番茄开花时间调控基因FTL1的图位克隆与功能分析

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:limingxhss2
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番茄(Solanum lycopersicum)是一种重要的蔬菜作物,在农业经济和粮食生产中占据重要地位。野生醋栗番茄(S.pimpinellifolium)起源于南美洲安第斯山脉,属于短日照植物。经过长期的人工驯化选择,栽培番茄成为日中性植物,在世界各地广泛种植。前人研究发现,栽培番茄中SELF PRUNING 5G(SP5G)3’UTR存在一个52-bp的序列缺失导致其表达量下降,从而降低了对长日照的敏感性,但栽培番茄如何响应短日照的分子机制仍不清楚。本研究以日中性的栽培番茄S.lycopersicum cv.Moneymaker(MM)和短日照敏感的野生醋栗番茄S.pimpinellifolium accession PI365967(PP)构建的重组自交系(RILs)群体为材料,通过关联分析获得一个短日照条件下调控番茄开花时间的主效QTL位点qFON10。进一步利用近等基因系(NILs)及BC3F2群体进行精细定位,将qFON10位点定位到11号染色体4-kb的区间范围内,候选区间只有2个基因Solyc11g008650和Solyc11g008660,均为拟南芥FT的同源基因。通过RT-PCR及测序证明,Solyc11g008650和Solyc11g008660是一个基因,并命名为Flowering locus T-like1(FTL1)。MM中由于2-bp的序列缺失造成FTL1蛋白提前终止。利用CRISPR/cas9基因编辑技术获得了ftl1cr突变体株系,发现短日照条件下ftl1cr突变体株系的开花时间晚于野生型,而长日照条件下ftl1cr突变体株系的开花时间和野生型没有显著差异,说明FTL1仅在短日照条件下促进番茄开花。与其功能相一致,FTL1仅在短日照条件下特异表达。酵母双杂交试验和双分子荧光互补试验表明FTL1可以和14-3-3/2互作与SP-interacting G-BOX(SPGB)形成开花激活复合物调控番茄开花。短日照条件下,FTL1通过促进SFT表达调控番茄开花。发现具有ftl1MM或sp5gMM基因型的樱桃番茄在番茄起源地附近分布,说明FTL1和SP5G在驯化过程中被独立选择。在野生醋栗番茄中同时突变FTL1和SP5G可以降低其对光照期的敏感性,加快其驯化过程。本论文揭示了FT同源蛋白FTL1在番茄开花调控中的功能,解析了番茄响应短日照开花的分子机制,并为研究FT不同同源蛋白的作用机制提供了新见解。
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