论文部分内容阅读
目的：胃癌仍是最常见的恶性肿瘤之一，病死率居各类癌症死亡的首位。早期发现、早期治疗是提高恶性肿瘤治愈率和生存率的关键，特别是在癌前状态及癌前病变即开始进行诊治对于胃癌的预防具有重要意义。但是胃癌的形成机制目前尚未明确。近年来发现微卫星不稳定性(MSI)在部分肿瘤的发生发展中发挥着重要作用，它主要由DNA错配修复基因缺陷造成，代表一种新型的基因组不稳定性，能够增加一些基因的突变率。国内外关于散发性胃癌和胃腺瘤的研究中发现同样具有MSI现象，同时一些研究者证实部分基因(包括R Ⅱ、IGF ⅡR、Bax、E2F4、hMSH3、hMSH6等)在编码区的重复序列处发生插入或缺失突变，但是研究资料的数量仍显不足，同时在不典型增生、肠化生及增生性息肉阶段关于MSI与基因突变的报道很少见，不能全面反应胃癌发生过程中这些分子事件。本研究同时检测了胃癌、癌前病变、胃增生性息肉组织中R Ⅱ、IGF ⅡR和Bax基因突变与MSI发生情况，以了解其相关性，进一步探讨MSI在肠化生-不典型增生-胃癌途径和胃增生性息肉中的作用。 方法：胃镜下活检胃癌组织及远离肿瘤边缘5cm以外正常胃粘膜36例，均经病理证实，上述活检组织液氮快速冷冻，转至-80℃保存。胃增生性息肉内镜套切术后组织标本及正常胃粘膜组织23例取材及保存方法同胃癌。采用酚与氯仿法抽提以上新鲜冷冻组织的基因组DNA。病理室收集41例胃不典型增生和51例肠化生石蜡组织标本，每例均设有自身相对正常 南京医科大学硕士学位论文组织对照。采用二甲苯与蛋白酶K法提取所有石蜡组织的基因组DNA。非变性聚丙烯酸胺凝胶电泳银染PCR一SSCP方法同时检测上述组织基因组DNA中BAT一25、BAT一26、D55346、D175250、D25123五个微卫星位点MSI的发生情况和Rll基因(A)小IGFllR基因(G):、Bax基因(G):等位点有无突变。被检测组织与自身正常组织相比，若出现条带增加或迁徒即记作MSI或基因突变。 结果:胃癌组织中MSI发生率达58.3%，其中MSI一H占19.4%，MSI一L占38.9%，MSI一H、MSI一L与MSS型胃癌在年龄、性别、肿瘤位置、生长方式以及HP感染方面差异无统计学意义。Rll、IGF llR和Bax基因分别有7例、6例和6例发生突变，突变者与正常者在年龄、性别、部位、分化程度、生长方式及HP感染差异亦未见统计学意义，但突变多发生于中度以上分化的胃癌。所有基因突变均见于MSI阳性的胃癌，尤其是MSI一H型胃癌，MSI一H型胃癌与MSI一L型胃癌相比Rll或IGF nR基因突变发生率具有显著性差异(P分别为0.017、0.006)。而不典型增生MSI发生率为26.8%(11/41)，其中MSI一H型3例，MSI与MSS型不典型增生在年龄、性别、部位和分化程度等方面差异无统计学意义，仅有2例中度分化的MSI一L型不典型增生组织见到Bax基因发生突变。肠化生组织MSI发生率为17.6%(9/ 51)，仅有1例为MSI一H型，秋和检验显示MSI多发生于中度肠化生(了月.630，尸一0.000)。胃增生性息肉组织MSI发生率为21.7%，均呈MSI一L型，MSI一L与MSS型息肉在年龄、性别、位置、大小等方面差异无统计学意义，仅有1例BAT一26位点不稳定的MSI一L型息肉发生Rll基因突变。 南京医科大学硕士学位论文 结论:MSI在肠化生一不典型增生一胃癌途径中发挥着一定的作用，且具有累积现象。它的存在代表一定程度的错配修复基因缺陷，可能增加其它基因突变率，特别是部分抑癌基因突变，促进了部分胃癌的发生发展。胃癌组织中Rll、IGFllR和Bax基因可发生突变，且突变多发生于简单重复序列处。这些突变与MSI特别是MSI一H关系密切，是胃癌发生发展过程中的较晚期事件。胃增生性息肉中存在MSI现象，对于息肉的癌变可能具有一定的意义。