肢体缺血预处理对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的保护作用

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目的:通过检测肺功能的变化,支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞和乳酸脱氢酶(LDH),血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫组织化学方法检测肺组织SP-A表达水平及HE染色观察肺组织病理改变来研究非创伤性肢体缺血预处理(N-LIP)对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的保护作用。方法:将15只SD雌性大鼠随机分为对照组、急性肺损伤组(ALI组)、急性肺损伤+非创伤性双下肢缺血预处理组(ALI+N-LIP组)。戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,ALI+N-LIP组用止血带捆绑双下肢,阻断血流5min,再开放5min,反复3次,每次捆绑以双下肢紫绀、捆绑下方腹股沟处摸不到股动脉搏动为准;之后ALI组和ALI+N-LIP组分别予以腹腔注射脂多糖(4mg/kg),对照组注射等量生理盐水;1h后用Buxco有创肺功能仪,以乙酰甲胆碱(methacholine,Mch)0.39ng/mL、0.78ng/mL、1.56ng/mL、3.12ng/mL依次激发,检测大鼠气道阻力(AR)、动态肺顺应性(Cdyn)的变化,收集肺泡灌洗液(BALF),取血及肺组织。细胞计数法测定BALF中白细胞(WBC)数量,全自动生化分析仪检测BALF中乳酸脱氢酶(LDH)含量,比色法测血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫组织化学方法检测肺组织中肺泡表面活性物质相关蛋白-A(pulmonary surfactant associatedprotein,SP-A)的表达水平,HE染色观察肺组织病理变化。结果:1.较正常对照组相比,Mch激发后ALI组气道阻力(AR)明显增高(P<0.01),动态肺顺应性(Cdyn)明显减弱(P<0.01)。ALI+N-LIP组大鼠气道阻力(AR)的增高程度(P<0.01)、动态顺应性(Cdyn)的减弱程度(P<0.01)均明显小于ALI组。2.支气管肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中,ALI组的白细胞数(P<0.01)、LDH含量(P<0.01)比对照组明显升高;ALI+N-LIP组BALF中白细胞数(P<0.01)和LDH含量(P<0.01)也增高但增高程度均明显小于ALI组(P<0.05)。3.ALI组血清中超氧化物歧化酶(SOD)总活力比对照组明显降低(P<0.01);丙二醛(MDA)含量比对照组明显升高(P<0.01);ALI+N-LIP组T-SOD降低、MDA升高的程度均明显小于ALI组(P<0.05)。4.SP-A免疫组织化学显示:ALI组肺组织中SP-A含量较对照组明显降低;ALI+N-LIP组的SP-A的含量比对照组、AIL组明显增多。5.肺部HE染色显示ALI组、ALI+N-LIP组均有不同程度的肺损伤,即有肺组织毛细血管出血,肺泡间隔增宽,肺泡融合,肺泡腔内出现炎性细胞浸润。但ALI+N-LIP组损伤程度明显轻于ALI组。结论:非创伤性肢体缺血预处理对脂多糖诱导的急性肺损伤有保护作用,其作用机制可能与促进SP-A表达和抗氧化作用有关。
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