藏药细叶亚菊化学组成及生物活性研究

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细叶亚菊(Ajania tenuifolia)多年生草本,产甘肃中部、四川西北部、西藏东部及青海。生于山坡草地,海拔2000-4580米。印度西北部也有分布。细叶亚菊藏语为“坎巴嘎保”、“普芒嘎布”,茎枝治痈疖,肾病,肺病:地上部分治虫病,咽喉病,溃疡病,炭疽病。本文通过对细叶亚菊全草脱脂处理,在用75%乙醇超声浸提。将提取物进行HPLC-MS分析,鉴定出7种主要成分。分别为金丝桃苷、槲皮素、异槲皮素苷、新绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、木犀草素。对细叶亚菊全草75%乙醇提取物进行了总酚总黄酮含量测定并系统的检测其体外抗氧化活性。结果显示,细叶亚菊乙醇提取物所含总酚含量为32.7±2.0μg/ml,总黄酮含量为14.19±1.29μg/ml。本文对细叶亚菊75%乙醇提取物(EEAT)进行了抗氧化体外实验、抗UVB实验、抗白色念珠菌及抑菌机理研究。发现EEAT对DPPH、ABTS、O2-等自由基有明显的清除效果。本文通过对大鼠肝脏线粒体UVB辐射处理,检测线粒体脂质过氧化氢(LOOH)、共轭二烯(CD)、4—硝基任烯酸(4—HNE)含量,发现EEAT处理后的线粒体相对于空白组中硫代巴比妥酸结合物TBARS、脂质过氧化氢(LOOH)、共轭二烯(CD)、4—硝基任烯酸(4—HNE)含量降低。本实验用运倍半稀释法测定了EEAT对六种白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC)。绘制了EEAT处理组、空白组和阳性对照组在24h中六种白色念珠菌的生长曲线。对提取的白色念珠菌中的线粒体进行苹果酸脱氢酶(SDH)、琥珀酸脱氢酶(MDH)、Na-K ATPase、Ca-Mg ATPase含量检测发现EEAT可以抑制线粒体里的四种酶。EEAT可以使白色念珠菌C.albicans ATCC64550线粒体里的的ROS累积的。EEAT可以促使白色念珠菌细胞凋亡。结果表明细叶亚菊在抗氧化、抗紫外辐射损伤、抗白色念菌方面有比较突出的效果。本论文为细叶亚菊的活性及成分研究和新药筛选提供科学依据,为我国天然产物资源的开发和利用提供基础研究数据支持。
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