IPF不同中医证型间HIF-1α、PDGF、PEDF、ES相关性研究及益气养阴活血法对IPF大鼠血管新生因子的动态影响

来源 :安徽中医药大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:loganhuang
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目的1研究痰湿蕴肺证、痰瘀阻肺证、气阴两虚夹瘀证三种IPF患者的血清APTT、FBG、D-D、HIF-1α、PDGF、PEDF、ES含量的相关性。2研究以益气养阴活血法组方的参七虫草方对肺纤维化大鼠的肺组织病理、血清HIF-1α、PDGF、PEDF、ES的动态影响。方法1临床研究:收集证属痰湿蕴肺证、痰瘀阻肺证、气阴两虚夹瘀证IPF患者各30例,健康体检者30例做为正常组,采集四组病例血清APTT、FBG、D-D、HIF-1α、PDGF、PEDF、ES进行证型间的相关性比较。2动物实验:将128只大鼠随机分为空白组(K组)、模型组(M组)、泼尼松组(P组)、参七虫草组(S组),每组32只,空白组大鼠采用气管滴注生理盐水的方式进行假手术,其余三组大鼠采用同样方法气管滴注博来霉素进行造模,在造模后第7、14、21、28天分别取左肺下叶做HE染色、Masson染色观察肺组织病理变化,并采集各个时间点大鼠的腹主动脉血血清,ELISA法检测HIF-1α、PDGF、PEDF、ES的含量。结果1.临床研究1.1与正常组相比较,IPF患者血清的APTT含量降低,有显著的差异(P<0.01),痰湿蕴肺组患者血清APTT含量均比痰瘀阻肺组、气阴两虚夹瘀组患者血清APTT含量高(P<0.01)。与正常组相比较,IPF患者血清的FBG含量显著升高(P<0.01),与痰湿蕴肺组比较,痰瘀阻肺组、气阴两虚夹瘀组FBG含量更高,有统计学意义(P<0.01)。与正常组相比较,IPF患者三组的D-D表达含量高(P<0.01),与痰湿蕴肺组比较,痰瘀阻肺组、气阴两虚夹瘀组含量高,有明显差异(P<0.01)。1.2与正常组相比较,IPF患者三组血清的促血管生长因子HIF-1α、PDGF表达明显旺盛(P<0.01),而且痰瘀阻肺组、气阴两虚夹瘀组的促血管生长因子HIF-1α、PDGF含量高于痰湿蕴肺组(P<0.05)。与正常组相比较,IPF患者三组血清的血管新生抑制因子PEDF、ES含量显著升高(P<0.01),与痰湿蕴肺组相比,痰瘀阻肺组、气阴两虚夹瘀组血管新生抑制因子PEDF、ES含量更高(P<0.05)。2动物实验2.1 HE染色:造模后第7、14、21、28天空白组大鼠肺组织结构正常完整。造模后第7、14、21、28天模型组大鼠肺泡间隔逐渐增宽,间质内炎性细胞逐渐减少,第21天炎性细胞比第14天少,至第28天几乎未见炎性细胞。泼尼松组与参七虫草组病理改变与模型组相似,但程度相对较轻,以参七虫草组最明显。2.2 Masson染色:造模后第7、14、21、28天空白组大鼠的肺泡间隔未见蓝染区。造模后第7、14、21、28天模型组大鼠肺泡间隔均可见染成蓝色的胶原纤维沉积,颜色逐渐加深,蓝色区域面积逐渐增大,泼尼松组、参七虫草组与模型组相对应的点比较发现蓝色面积较小,颜色较浅,纤维化程度较轻,以参七虫草组显著。2.3造模后第7、14、21、28天,与空白组比较,模型组、泼尼松组、参七虫草组的HIF-1α含量均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,相对应的时间点泼尼松组与参七虫草组含量显著降低(P<0.01)。泼尼松组与参七虫草组相比较,两者数值无统计学意义,但参七虫草组HIF-1α含量偏低。2.4造模后第7、14、21、28天,与空白组相比较,模型组、泼尼松组、参七虫草组的PDGF含量明显升高,具有显著差异性(P<0.01)。与模型组比较,泼尼松组与参七虫草组PDGF含量表达降低(P<0.01)。泼尼松组与参七虫草组比较,两者含量无统计学意义,参七虫草组PDGF含量更低。2.5在造模后第7、14、21、28天,模型组、泼尼松组、参七虫草组的PEDF含量高于空白组(P<0.01)。与模型组比较,与之相对应的时间点泼尼松组、参七虫草组明显PEDF表达明显升高(P<0.01)。泼尼松组与参七虫草组含量比较无统计学意义,但参七虫草组的PEDF含量更高。2.6在造模后第7、14、21、28天,与空白组比较,模型组、泼尼松组、参七虫草组的ES含量显著上升(P<0.01)。与模型组比较,与之相对应的时间点泼尼松组、参七虫草组的ES表达均显著升高(P<0.01)。泼尼松组与参七虫草组含量比较,无统计学意义,但参七虫草组ES含量更高。结论1 IPF归属于“肺痿”,主要的中医病机为“肺失治节,因虚致瘀”。2 IPF患者存在高凝状态,痰瘀阻肺证与气阴两虚夹瘀证患者比痰湿蕴肺证患者更显著。3 IPF患者促血管新生因子、抑制因子高度表达,痰瘀阻肺证、气阴两虚夹瘀证患者血管新生因子比痰湿蕴肺证患者表达更旺盛。4 IPF的发病机制与血管新生密切相关,参七虫草方可能通过抑制促血管生长因子、促进抑制因子的表达抑制血管新生,缓解肺纤维化。5以益气养阴活血法立法的治疗方法能够改善肺纤维化,可能与该法调节血管新生相关因子从而抑制血管新生有关。
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