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目的:
人类肿瘤可溶性分子通过基质转运的机制与体内肿瘤行为特征密切相关,但在传统组织制备过程中所形成的人工假象阻碍了组织中可溶性成份的检测。在本研究中,分别采用“活体冷冻技术”(IVCT)和冷冻活检术(Cb)对异种移植人类肿瘤细胞模型中,内源性和外源性血浆成份的免疫分布情况进行了检测,这两种技术都可使靶组织直接在活体状态下冷冻固定。
方法:
把人类肺癌细胞注人裸鼠背部皮下后,用不同方法制备肿瘤组织的石腊切片和冰冻切片,进行免疫定位检测血浆蛋白,如白蛋白、免疫球蛋白G1(IgG1)和免疫球蛋白M(IgM),以及经尾静脉注入的牛血清白蛋白(BSA)。
结果:
与传统方法相比,IVCT和Cb可更为清楚地观察肿瘤间质中血浆蛋白的免疫分布情况。IgM主要分布在肿瘤血管中,而白蛋白和IgG1出现在肿瘤间质及肿瘤细胞外基质中。此外,经尾静脉注射的牛血清白蛋白可在24小时内从毛细血管渗出到肿瘤周围结缔组织中,连续注射3天后可逐渐扩散到肿瘤间质及细胞外基质。
结论:
对于从毛细血管渗漏的蛋白分子在进展期肿瘤的不同部位变化很大,而且小分子血浆蛋白(非大分子蛋白)大量分布在肿瘤细胞外基质。对肿瘤血循环中可溶性蛋白的免疫组化研究显示,IVCT和Cb比传统技术更有利于组织病理学分析。