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胶原是结缔组织中重要的结构蛋白质,主要存在于动物的皮、骨、软骨、牙齿、肌腔、韧带和血管中,胶原蛋白现已广泛用于临床医学、食品、化妆品等领域。胶原蛋白作为一种天然的动物生物质资源,其显著的低免疫原性、生物相容性、可吸收降解性及止血功能和无毒安全性好使其作为生物材料具有独特的优势,被认为是“最有用的天然生物材料之一”。本文主要研究了从猪肌腱中提取胶原蛋白以及其特性的研究,主要研究内容和结果如下:
1.用酸+酶法从新鲜猪肌腱中提取胶原蛋白。以双缩脲法测定粗提液中蛋白质的浓度作为优化提取手段,从酸度、酶比和时间,三个因素进行考察。实验结果表明,当酸浓度为0.3 mol/L,酶与猪肌腱重量比为1:10时,提取时间为3天的条件是最优提取条件。同时探讨了提高得率和纯度方面的一些实验经验细节问题。用紫外吸收光谱、傅立叶变换红外光谱分析、氨基酸组成分析以及电泳等手段对其进行表征,显示胶原样品基本保留了其天然结构。
2.用提取出的胶原样品冷冻干燥成膜,论文选用单宁酸和戊二醛两种交联剂对胶原蛋白膜样品进行改性。利用傅立叶变换红外光谱探讨其交联的反应历程,采用DSC分析交联样品的热稳定性,显示两种交联剂交联胶原均有较高的热稳定性,生物稳定性好,适用于作生物材料。
3.利用壳聚糖独特的生物学特性以及良好的生物相容性及止血和促进伤口等作用,将胶原蛋白与壳聚糖以不同比例混合冻干制备成多孔复合海绵材料。合海绵材料显示出强大的吸水力,通过红外光谱和X-衍射显示出两者混合对其结构的影响,同时对比热变性温度显示混合物具有高的热稳定性。