【摘 要】
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该研究分为三大部分.在前两部分,采用基因转染技术,将hTrp3或hTrplcDNA分别转染到HEK293细胞并获得稳定表达,然后用Fura-2/AM荧光探针测定[Ca],比较这两种亚型的Trp蛋白对α-
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该研究分为三大部分.在前两部分,采用基因转染技术,将hTrp3或hTrplcDNA分别转染到HEK293细胞并获得稳定表达,然后用Fura-2/AM荧光探针测定[Ca<2+>]<,I>,比较这两种亚型的Trp蛋白对α<,1B>-AR和thapsigargin引起的Ca<2+>内流的影响;同时还观察酷氨酸激酶抑制剂、Cl<->通道阻断剂和IP<,3>受体阻断剂对转染前后细胞α<,1B>-AR和thapsigargin引起的Ca<2+>内流的作用.在最后一部分,采用Westernblot和免疫沉淀方法,检测α<,1B>-AR激动或thapsigargin刺激后,hTrp3和hTrp1蛋白的酪氨酸磷酸化状态,并观察Cl<->通道阻断剂和IP<,3>受体阻断剂对其酷氨酸磷酸化状态的影响.
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