系统性红斑狼疮(SLE)是一种复杂的自身免疫性疾病,其特征为免疫复合物沉积在多种组织器官引起的免疫病理损伤。一般认为,SLE是多因性的疾病,先天遗传的易感因素和外界环境的作用对机体的免疫功能产生影响,导致免疫调控机制的缺陷。近二十年来,以基因芯片为代表的高通量新技术的出现为SLE生物标记物的寻找开辟了有效的道路。在本实验室的前期工作中,已经使用基因芯片完成了对7例SLE家系和4例正常对照外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)中mRNA的表达水平的筛选,发现在SLE患者与正常对照中存在着表达量有显著差异的多个基因,其中有一些基因与机体的免疫功能有一定的关系比如CD200, ID3和DUSP-2等等。本研究的目的是在SLE患者与正常对照中对PBMC中CD200, ID3, DUSP2的mRNA的表达水平的差异进行验证,并分析其编码的蛋白表达水平的差异,同时研究其与疾病活动性以及不同靶器官损害的相关性,以寻找可能的生物标记物与治疗靶点。首先我们用RT-PCR的方法对7例SLE患者与6例正常对照PBMC中mRNA的表达水平进行初步验证,发现在SLE患者PBMC中CD200与内参基因光密度的比值较正常对照显著下降(p<0.05),而ID3和DUSP2与正常对照之间无显著差异。然后,我们采用了Real-time PCR在mRNA水平对CD200及受体CD200R进行进一步研究。我们选择了46例SLE患者,其中有神经精神症状的患者为11例,有肾脏受累的患者为19例,初发未经治疗的患者11例；同时选择了27例年龄与性别相匹配的健康志愿者作为正常对照。用ΔCt(目的基因的Ct值一内参基因的Ct值)对SLE患者与正常对照,SLE患者的不同亚组进行比较。发现SLE患者中CD200, CD200R的ACt值较正常对照显著升高(p<0.05),同时,有神经精神症状的SLE患者CD200, CD200R的ACt值较无神经精神症状的SLE患者显著升高(p<0.05),而在有肾脏受累以及无肾脏受累的患者之间无显著差异,CD200与CD200R的ΔCt值显著相关。确定CD200在mRNA水平在SLE患者与正常对照存在显著差异后,我们使用流式细胞术对CD200在细胞表面的表达水平进行了检测。共选择了20例SLE患者与23例年龄与性别匹配的正常对照,使用流式细胞仪检测PBMC上以及T细胞、B细胞表面的CD200的表达情况,用阳性细胞的百分比对SLE患者与正常对照进行比较。结果发现,SLE患者PBMC中,CD200+细胞的百分比较正常对照显著升高(p<0.05),而在CD3+的细胞中,CD200+细胞的百分比较正常对照显著下降(p<0.05)。在CD19+的细胞中,CD200+的百分比较正常对照无显著差异。另外,对CD200的表达与临床指标的相关性进行分析的结果显示,CD200的相对表达量以及阳性细胞的百分比与SLEDAI评分,ESR之间没有相关性,而CD200的ΔCt值与CD3+CD200+细胞的百分比与C3的值呈负相关(p<0.05)。本研究表明,在SLE患者中CD200/CD200R存在显著的变化,可能与SLE的发病以及神经精神症状的出现有一定的联系。CD200+的表达在mRNA水平和细胞表面水平并不一致,提示CD200可能以其他的形式存在,有待于进一步的研究。T细胞中CD200+的细胞表达水平的下降提示CD200可能参与T细胞的调节,对细胞具体功能的影响仍需进一步的研究。