紫花苜蓿锌指蛋白基因的克隆及初步鉴定

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利用紫花苜蓿抑制消减杂交cDNA文库筛选出一个与大豆锌指蛋白同源性高的EST序列。根据此片段序列设计3’端和5’端特异引物,利用3’RACE和5’RACE技术分别得到865bp和1186bp的片段。通过序列拼接获得该基因的全长cDNA,序列分析其含有一个完整的开放阅读框,编码的蛋白质含有418个氨基酸。将该氨基酸序列进行Blast比较,结果显示其与已知植物锌指蛋白具有高度的同源性,其中与大豆锌指蛋白同源性高达93%。说明克隆的基因为紫花苜蓿锌指蛋白基因,命名为MsZFN,并在Genbank中登陆(E
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