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目的：在不同时间点采用不同浓度的IL-17F干预大鼠原代成骨细胞，观察对大鼠原代成骨细胞的增殖能力和ALP活性的影响，以及对大鼠成骨细胞的转录因子Runx2和Osterix mRNA的表达的影响。探讨IL-17F对大鼠成骨细胞增殖和分化功能的作用，观察成骨细胞特异性转录因子Osterix以及Runx2 mRNA在IL-17F干预下表达的变化，探寻炎症因子IL-17F在骨形成中的作用，以期为临床治疗骨质疏松和相关骨代谢疾病提供理论依据。 方法： 1.细胞提取、培养和鉴定: 取出生24小时以内Wistar大鼠8只，雌雄不限，采用拉颈法处死，在无菌条件下取其颅骨，分别采用胰酶-胶原酶消化法和组织块反复贴壁法提取原代成骨细胞，37℃、5％CO2、饱和湿度培养箱内进行细胞培养，待细胞生长至培养瓶底面积80％左右时进行细胞传代，并采用差异贴壁法纯化成骨细胞。采用第4代成骨细胞进行实验。 成骨细胞的鉴定: (1)采用倒置相差显微镜观察成骨细胞形态和生长情况，定期拍照记录。 (2)采用碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，ALP)染色法（钙钴法）鉴定成骨细胞。 2.实验分组及处理: 将第3代成骨细胞，胰酶消化、离心后制成细胞悬液，细胞计数并调整细胞浓度至5×105/ml，加入到6孔板中培养24小时。待细胞贴壁后换用无血清培养基培养24小时，使细胞同步化。将6孔板内细胞随机分为对照组和实验组，对照组采用含10％胎牛血清(Fatal bovine serum，FBS)低糖DMEM培养基培养，前期预实验分别用1ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml和100ng/ml的IL-17F干预成骨细胞，结果显示浓度为20ng/ml、50ng/ml、100ng/ml的IL-17F对成骨细胞的作用明显，因此实验组分别应用含有20ng/ml、50ng/ml、100ng/ml IL-17F的10％FBS低糖DMEM培养基进行培养。分别在IL-17F干预后的第1、3天留取细胞上清液待测，-80℃保存，成骨细胞进行以下检测。 3.指标检测 (1)采用CCK-8法检测成骨细胞增殖。 (2)采用微量酶标法检测成骨细胞培养上清液中ALP活性。 (3)采用RT-PCR法检测成骨细胞转录因子Runx2和Osterix mRNA的表达变化。 结果： 1.成骨细胞的分离、培养和鉴定: 胰酶-胶原酶消化法和组织块反复贴壁法均可获取大鼠成骨细胞，其细胞形态特征和生长情况符合成骨细胞特点。通过倒置相差显微镜观察ALP染色结果，发现成骨细胞内的ALP反应生成不溶性染料，呈现黑色颗粒或团块，证明所培养细胞为成骨细胞。 2.CCK-8检测细胞增殖: 与对照组相比，第1天细胞增殖率实验组50ng/ml组和100ng/ml组均明显升高，差异有统计学意义(P＜0.05)，20ng/ml组也有升高，但差异无统计学意义;第3天实验组20ng/ml、50ng/ml组和100ng/ml组均高于对照组(P＜0.05);第5天的实验组20ng/ml组、50ng/ml组和100ng/ml组细胞增殖率增加，差异有统计学意义(P＜0.05)。 与实验组20ng/ml组相比，实验组100ng/ml组在第1、3、5天细胞增值率升高，差异有统计学意义（P＜0.05）;第3天50ng/ml组和100ng/ml组均高于20ng/ml组，差异有统计学意义(P＜0.05)。 与实验组50ng/ml组相比，100ng/ml组在1、3和5天均明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。 3.微量酶标法检测细胞上清液ALP活性 与对照组相比，第1天实验组20ng/ml和50ng/ml组ALP活性降低，100ng/ml组ALP活性增加，差异具有统计学意义（P＜0.05）;第3天实验组20ng/ml和50ng/ml组ALP活性较对照组降低，而100ng/ml组ALP活性与对照组、20ng/ml组和50ng/ml组相比均增加，差异具有统计学意义(P＜0.05)。 4.Runx2和Osterix mRNA表达变化 与对照组相比，1、3、5天50ng/ml组和100ng/ml组Runx2mRNA表达增高(P＜0.05);与实验组20ng/ml组相比，第1、3天100ng/ml组Runx2 mRNA表达均增加(P＜0.05)，第5天50ng/ml组和100ng/ml组Runx2 mRNA表达均升高（P＜0.05）;与50 ng/ml组相比，实验组1、3、5天100ng/ml组Runx2 mRNA表达均增加，差异具有统计学意义(P＜0.05)。 与对照组相比，实验组第1、3和5天的50ng/ml组和100ng/ml组Osterix mRNA表达均明显增加，差异具有统计学意义（P＜0.05）;第1、3、5天50ng/ml组和100ng/ml组Osterix mRNA表达高于实验组20ng/ml组，差异具有统计学意义(P＜0.05);各时间点实验组100ng/ml组Osterix mRNA表达均高于50ng/ml组，差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论： IL-17F在20ng/ml～100ng/ml浓度范围内可促进成骨细胞的增殖活性，提高ALP活性，这种促进作用很可能与IL-17F上调成骨细胞特异性转录因子Osterix及Runx2 mRNA表达有关，浓度为100ng/ml的IL-17F促进作用尤为显著。