目的:运用薄层色谱法、高效液相色谱法筛选出最佳道地产地的红花、赤芍,以Fick扩散定律为基础,建立出补阳还五汤中红花、赤芍的煎煮动力学模型并进行验证;在此基础上考察影响补阳还五汤提取工艺的因素,利用正交试验法确定最佳的补阳还五汤的提取工艺。方法:1.优选出最佳道地产地的红花购买四川简阳、新疆裕民、新疆吉木萨尔、云南永胜、云南巍山、甘肃玉门、新疆伊宁7个产地的红花,其中四川简阳、新疆裕民、甘肃玉门产地的红花各2份,采用薄层色谱法对是个批次的红花进行薄层鉴定,采用HPLC法对羟基红花黄色素A含量进行测定。薄层条件为:吸取各溶液各5μl,采用CAMAG薄层自动点样器,分别在同一硅胶H薄层板上点样,以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇(7:2:3:0.4)为展开剂,展开,取出,晾干;色谱条件为:安捷伦C18柱(Nu-Analytical,250mm×4.6mm,5μm);柱温:25℃C;流动相为甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(26:2:72);流速:lml/min;检测波长:403nm:进样:10μl。2.优选出最佳道地产地的赤芍购买内蒙古多伦县、辽宁省西丰县、吉林省四平县、安徽省亳州、黑龙江省大庆、内蒙古鄂伦春旗、辽宁省凤城、黑龙江省佳木斯市、内蒙古阿尔山、内蒙古兴安盟等10个产地的赤芍,采用薄层色谱法对十个批次的赤芍进行薄层鉴定,采用HPLC法对其含有的芍药苷进行测定比较。薄层条件为:吸取各溶液各4μ1,分别在同一硅胶G薄层板上点样,以乙酸乙酯-三氯甲烷-甲醇-甲酸(5:40:10:0.2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,加热至斑点显色清晰;色谱条件为:安捷伦C18 安捷伦 C18((Nu-Analytical,250mm×4.6mm,5μm);柱温:30℃;流动相为甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(40:65);流速:lml/min;检测波长:230nm;进样:10μl。3.建立补阳还五汤中四种有效成分含量的测定方法以羟基红花黄色素A、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芍药苷和阿魏酸作为补阳还五汤的指标性成分,探索和改进HPLC的色谱条件,确立补阳还五汤的HPLC测定法。4.建立补阳还五汤中红花药材的煎煮动力学模型以Fick扩散定律为基础,研究红花主要有效成分羟基红花黄色素A在补阳还五汤中的煎煮动力学,建立红花煎煮动力学模型,推算得出方程的各个参数,将所得结果代入方程(?)中进行拟合。5.建立补阳还五汤中赤芍药材的煎煮动力学模型以Fick扩散定律为基础,研究赤芍主要有效成分芍药苷在补阳还五汤中的煎煮动力学,建立赤芍的煎煮动力学模型,推算得出方程的各个参数,将所得结果代入方程(?)中进行拟合。6.优选出最佳的补阳还五汤提取工艺选取补阳还五汤中的主要成分羟基红花黄色素A、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芍药苷和阿魏酸作为含量的四个指标,在液相条件按照“3”项下,采用正交试验法,将溶剂倍量、提取时间、提取次数按照L9(34)正交表进行正交试验,并且与补阳还五汤中红花、赤芍药材煎煮动力学相互结合优选其最佳提取工艺。7.数据分析文中数据的分析用到Microsoft Office Excel 2016和SPSS17.0软件,统计方法用于计量资料的分析,线性回归分析和正交试验设计。结果:1.优选出最佳道地产地的红花薄层结果:十份红药样品在相应的位置上,均显相同颜色的斑点;高效液相色检测含量最高为“四川简阳2”,其羟基红花黄色素A含量为2.58%。以羟基红花黄色素A含量从高到低的排序如下:四川简阳2>四川简阳1>新疆裕民1>新疆裕民2>新疆吉木萨尔>云南永胜>云南巍山>甘肃玉门2>甘肃玉门1>新疆伊宁,得出此十份红花中最佳道地产地为四川简阳。2.优选出最佳道地产地的赤芍薄层结果:十份赤芍样品在相应的位置上,均显相同颜色的斑点;高效液相检测含量最高为“内蒙古多伦县”,其芍药苷含量为4.07%。芍药苷含量由高到底的排序如下:内蒙古多伦县>辽宁省西丰县>吉林省四平县>安徽省亳州>黑龙江省大庆>内蒙古鄂伦春旗>辽宁省凤城>黑龙江省佳木斯市>内蒙古阿尔山>内蒙古兴安盟,得出此十份赤芍中最佳道地产地为内蒙古多伦县。3.建立补阳还五汤中四种有效成分含量的测定方法使用HPLC法对补阳还五汤中羟基红花黄色素A、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸和芍药苷的测定,确立色谱条件为:固定相:安捷伦C18柱(Nu-Analytical,250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B),采用梯度洗脱(0～30min,5～20%A,95～80%B;30～60min,20～60%A,80～40%B;60～70min,60～90%A,40～10%B;70～80min,90%A,10%B);流速:1ml/min;检测波长:280nm;进样量:10μl。该方法精密度、稳定性和重复性良好,操作可行。4.建立补阳还五汤中红花药材的煎煮动力学模型推算出红花煎煮动力学的方程:(?),验证结果能良好地描述补阳还五汤中红花的动力学过程,试验数值与计算数值的标准偏差为4.37%,能够控制在工业标准偏差小于10%的要求范围内。5.建立补阳还五汤中赤芍药材的煎煮动力学模型推算出赤芍煎煮动力学的方程:(?),验证结果能良好地描述补阳还五汤中赤芍的动力学过程,试验数值与计算数值的标准偏差为为0.46%,能够控制在工业标准偏差小于10%的要求范围内。6.优选出最佳的补阳还五汤提取工艺利用SPSS软件对表试验数据进行处理分析,三种因素对羟基红花黄色素A提取的影响依次为C>B>A;三种因素对毛蕊异黄酮葡萄糖苷提取的影响依次为B>C>A;三种因素对芍药苷提取的影响依次为A>B>C;三种因素对阿魏酸提取的影响依次为C>A>B;故优选出总体最佳提取工艺为A2B1C2,即8倍量溶剂,每次提取60min,提取2次。结论:筛选出红花和赤芍的最佳道地产地,为补阳还五汤研究提供基础与质量保证;补阳还五汤中红花、赤芍药材的煎煮动力学模型的成功建立,为补阳还五汤提取工艺的深入研究提供实验基础与依据。