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目的:了解昆明地区5岁以下呼吸道感染患儿和喘息性疾病患儿中,人类博卡病毒(HBoV)感染的流行情况、主要临床特征及其混合感染情况,并对昆明市儿童呼吸道感染的病原谱作出补充。方法:收集于2009年9月至2010年9月,因急性呼吸道感染就诊的昆明地区5岁以下患儿鼻咽拭子标本550份,其中包括192份伴有喘息症状患儿的鼻咽拭子标本。应用多重PCR技术检测HBoV及其他常见呼吸道感染病原体。检测的病原共包括15种病毒、4种细菌和肺炎支原体、肺炎衣原体。其中15种病毒为腺病毒(A/B/C/D/E)、间质肺病毒(人偏肺病毒)、冠状病毒229E/NL63、冠状病毒OC43/HKU1、副流感病毒1、副流感病毒2、副流感病毒3、副流感病毒4、甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒A、呼吸道合胞病毒B、鼻病毒(A/B/C)、博卡病毒(1/2/3/4)以及肠道病毒(包括埃可病毒、柯萨奇病毒、脊髓灰质炎病毒等);4种细菌为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、百日咳杆菌和肺炎军团菌,以及肺炎支原体和肺炎衣原体。同时,收集所有患儿的临床资料以供分析研究。结果:1.550份≤5岁呼吸道感染患儿的鼻咽拭子标本中,共检测出细菌、病毒以及肺炎支原体阳性标本462例,总体阳性检出率为84%。其中,检出HBoV阳性标本18份,检出率占本研究中呼吸道感染患儿检测标本的3.3%;192份喘息性疾病患儿的鼻咽拭子标本中,共检测出细菌、病毒阳性标本174例,其阳性率为90.6%,其中,检出HBoV阳性标本10份,检出率占本研究中喘息性疾病患儿检测标本的5.2%。2. HBoV检测阳性标本的患儿年龄主要分布于1岁以下的儿童,尤其是8个月到1岁的患儿,占阳性病例的72%(13/18)。3.550份呼吸道感染患儿中,男性342例,女性208例,男女比例为1.6:1;18例HBoV阳性患儿中,男性13例,男性感染率3.8%(13/342);女性5例,女性感染率2.4%(5/208)。男性患儿发病率高于女性患儿发病率。男、女患儿发病率有统计学差异(X2检验,P<0.05)。4. HBoV阳性标本于11-12月检测到,其中11月份检出12例,12月份检出6例,从1月到10月未见到HBoV阳性的病人检出。5.在18例HBoV阳性的标本中,检出与其它病原体混合感染的17例,所占比率达94%(17/18)。与HBoV混合感染的病原依次是RSVA(占38.9%)、RSVB(占38.9%)、RV(占38.9%)、PIV3(占11.1%)、Flu A(占11.1%)、ADV(占5.6%)、流感嗜血杆菌(占16.7%)、肺炎链球菌(占10%)。6.18例HBoV阳性的病人中,12例临床诊断为急性支气管肺炎,占本研究中中急性支气管肺炎病例的3.7%(12/327);3例临床诊断为急性支气管炎,占本研究中急性支气管炎病例的3.1%(3/96);3例临床诊断为喘息性支气管炎,占本研究中喘息性支气管炎病例的5.7%(3/53)。7.基因序列分析表明,本研究中2份昆明地区的HBoV-VP1基因核苷酸片段与GenBank中HBoV基因序列同源性均为98%左右。结论:1. HBoV是本地区5岁以下儿童呼吸道感染的重要病原体,在本地区呼吸道感染患儿中的感染率为3.3%;在喘息性疾病患儿中感染率为5.2%。感染部位多位于下呼吸道。2.本次研究标本中,HBoV在呼吸道感染患儿中与其它呼吸道常见病原的混合感染率为94%(17/18);RSV是HBoV混合感染的最常见病原。没有混合感染的1个病例,临床症状较轻。3.本次研究期间内,HBoV的流行季节为冬季;HBoV感染年龄主要在1岁以下,最小的检出年龄为3.5个月;男性患儿发病率高于女性患儿。4. HBoV感染的主要临床表现为咳嗽、发热、呼吸困难及喘息等,与普通的喘息性肺炎和急性支气管肺炎类似。