磁性负载离子液体固定化Penicillium purpurogenum Li-3细胞的制备及催化性能研究

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针对甘草酸(GL)和甘草次酸(GA)均不能发挥最佳生物功效的问题,以定向催化GL生成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的产紫青霉菌(Penicillium purpurogenum Li-3)为对象,研究磁性负载离子液体海藻酸钙凝胶珠固定化产紫青霉细胞、磁性负载离子液体多层海藻酸钙微囊化产紫青霉细胞制备条件及其催化性能,主要研究工作和结果如下:(1)制备壳聚糖包覆四氧化三铁(Fe3O4/CS)纳米粒子和磁性负载1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐([BMIM]PF6)凝胶珠,材料表征表明,在加入[BMIM]PF6后的磁性凝胶珠表面的部分凸起增多;Fe3O4纳米粒子被壳聚糖包覆后,其晶型结构没有改变,而磁性负载[BMIM]PF6凝胶珠的晶型结构减弱;Fe3O4/CS和磁性凝胶珠具有良好的磁性能,在外加磁场作用下,Fe3O4/CS和磁性负载离子液体凝胶珠均能够实现有效分离。(2)制备磁性负载[BMIM]PF6凝胶珠固定化产紫青霉细胞,优化制备条件,最优制备条件为:海藻酸钠浓度为2.0%,CaC12浓度为2.0%,[BMIM]PF6加入量为9.0%,Fe3O4/CS加入比例为4:300,加菌量为6.0%;考察其催化性能表明,含离子液体细胞体系中GAMG产率高于不含离子液体细胞体系;此条件下,固定化细胞重复利用9次后,相对活性达到59.2%。(3)针对(2)中制备磁性负载[BMIM]PF6凝胶珠固定化产紫青霉细胞存在离子液体损失率较大的问题,在(2)优选条件基础上,制备磁性负载[BMIM]PF6多层海藻酸钙微囊化产紫青霉细胞,优选海藻酸钠覆膜浓度最佳为1.2%,最适覆膜层数为2层;在通过覆膜之后,[BMIM]PF6的损失率减小;考察覆膜2层微囊化细胞催化性能,结果表明,覆膜2层的微囊化细胞体系中GAMG产率比不覆膜凝胶珠固定化细胞体系高8.8%;磁性负载[BMIM]PF6双层海藻酸钙微囊化细胞重复利用9次后,相对活性达到81.5%。
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