目的:本研究采用过氧化氢(H2O2)建立氧化应激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤模型，用不同浓度的二氢杨梅素(DMY)干预处理后，观察DMY对研究HUVECs的保护作用，初步探讨其作用机制。　　方法:　　1、细胞培养:选用1640培养液，加入1％青链霉素、10％FBS配成完全培养基，PH值控制在7.2-7.4范围，置于37℃，5％CO2、相对湿度为95％培养箱中培养，按1∶2隔日传代，取对数生长期细胞用于实验。　　2、确立氧化损伤模型。根据不同浓度H2O2(0.25mmol·L-1，0.5mmol·L-1，1 mmol·L-1，2 mmol·L-1，4mmol·L-1）处理体外培养的HUVECs24小时后，用MTT检测不同浓度H2O2对HUVECs活力的影响。　　3、实验分组:正常对照组、H2O2组、DMY低剂量组、DMY中剂量组、DMY高剂量组。用不同浓度DMY（5μg·mL-1,20μg·mL-1，80μg·mL-1）预处理保护HUVECs12小时，再用0.5 mmol·L-1 H2O2干预12小时。取对数生长期细胞，待细胞贴壁生长至60-80％融合，按上述分组说明，分别加其所对应的培养液，分组处理。　　4、按Sigma公司说明书，使用MTT对各组进行细胞活力的检测。　　5、按碧云天试剂盒说明，对细胞核进行Hoechst33258染色。　　6、按南京建成试剂盒说明，分别取不同组别的上清液进行SOD活性、MDA含量检测。　　7、分别配置终浓度为10μmol/L DCFH-DA浓度和5μmol/L Fluo3-AM浓度。按碧云天试剂盒说明，用流式细胞仪分别对活性氧(ROS)和细胞内钙离子(Ca2+)的荧光强度进行检测。　　结果:　　1、不同浓度H2O2能明显抑制HUVECs的生长，其细胞活性与H2O2浓度呈线性负相关，均能引起HUVECs氧化损伤的反应。其中0.5mmol·L-1时细胞活性接近半数抑制率(IC50)，从而确立氧化损伤模型。　　2、按照实验分组的要求，分别处理相应各组。发现DMY浓度与HUVECs细胞活性呈负相关型，其中DMY低剂量组能显著提高H2O2损伤后HUVECs存活率(P＜0.05)，增加上清液SOD活性，降低MDA含量。　　3、从形态学上观察，细胞核的改变。正常HUVECs核呈弥散均匀低强度蓝色荧光，胞核较大，形态规则，呈圆形或者椭圆形状。H2O2组:细胞核呈集中高强度蓝色荧光，偶有些颜色发白，胞核较小，形态不规则，呈固缩致密浓染，或呈碎块状致密浓染，出现细胞凋亡。DMY（低/中/高）组:细胞核荧光强度随浓度增加而增加，胞核由低强度逐渐趋于高强度荧光、形状由规则圆形或者椭圆形逐渐呈不规则固缩致密浓染化、细胞数逐渐减少。　　4、与正常组相比，DMY低、中、高剂量组细胞内ROS含量均低于正常组。与H2O2组相比，不同浓度浓度DMY均能下调细胞内钙离子浓度，并与DMY浓度成正相关。表明DMY低剂量组效果最明显。　　结论:　　1、观察H2O2对HUVECs的氧化损伤反应。实验数据显示，H2O2能降低细胞内SOD活性，增加MDA含量，通过ROS-Ca+的信号通路最终引起细胞的凋亡。　　2、观察DMY对H2O2诱导对胞损伤具有保护作用，DMY能强细胞内SOD活性，降低MDA含量，可能通过降低细胞内ROS、Ca2+的生成来影响HUVECs凋亡事件的发生，证明DMY可以拮抗H2O2诱导HUVECs的氧化损伤。　　3、 DMY的浓度与其对H2O2诱导HUVECs的损伤的保护作用不存在线性相关。DMY高剂量组细胞活性反低于细胞活力H2O2组说明高浓度的DMY对细胞生长起抑制作用。