人鼻息肉组织及外周血T淋巴细胞亚群分布的研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xin24
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目的:鼻息肉是一种常见病,发病率较高(成人1~4%),复发倾向强(术后复发率15~40%),在鼻科临床中占有重要地位。因发病机制至今不清,给临床治疗带来很大麻烦。既往发病病因上有很多学说,例如感染学说和变态反应学说、植物神经功能失调、代谢紊乱、血管运动功能失调、离子通透性改变、气流动力学说、其中以感染和变态反应最为重要,但每个学说都从某一侧面解释了鼻息肉的成因,未能从根本上阐明发病机理。近年随着免疫学和分子生物学的快速发展,鼻息肉的发病被认为是多因素、多步骤的过程。变态反应可能不是鼻息肉形成的原因,T细胞介导的免疫反应则与鼻息肉形成关系密切。因此检测鼻息肉组织中及外周血中T淋巴细胞亚群的分布,探讨T淋巴细胞介导的免疫反应在鼻息肉中所起的作用,在理论上和实践中均具有重要意义。 方法:70例鼻息肉标本源自我科2003.10~2005.12住院手术的慢性鼻息肉患者,男38例,女32例;年龄25~69岁,平均47岁。其中Ⅱ型1期17例,Ⅱ型2期19例,Ⅱ型3期18例,Ⅲ型16例。所有患者均经鼻内窥镜、鼻窦CT检查以及术后病理诊断证实。30例对照组标本源自志愿者的下鼻甲粘膜。2组患者均无变应性鼻炎、哮喘、阿司匹林特异反应性、支气管扩张、慢性阻塞性肺病、自身免疫性疾病等典型病史,近期(2周内)无急性呼吸道感染及类固醇药物应用史。2组患者均用皮内试验法进行了吸入性变应原检测及血液中特异性IgE过筛检测,均为阴性。所有标本均于手术中取材,取下标本迅速放入10%中性缓冲福尔马林液中充分固定、石蜡包埋后备检。应用荧光免疫流式细胞术检测鼻息肉患者外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+的表达,并与正常人外周血的相应指标进行比较. 试剂:鼠抗人CD4、CD8单抗购于北京迈新公司,单克隆抗体鼠抗人CD3FITC、CD4PE、CD8PE购于美国BD公司,SP试剂盒购于北京迈新公司。染色方法采用S-P法染色步骤进行免疫组织化学染色。每例标本均同时做HE染色。统计学分析应用SAS统计软件对实验组和对照组各数据进行分析,方差齐做t检验,方差不齐做t检验,计算出p值(取p<0.05为差异有显著性)。 结果:阳性细胞计数:组织切片于光学显微镜下观察。CD4+或CD8+细胞呈典型深棕色胞膜表达。在高倍显微镜(10X40)下,分别于上皮下和血管腺体周围各选取10个视野,进行阳性细胞计数,取平均值,为每高倍视野平均阳性细胞数。并计算出各组CD4+/CD8+细胞数。 1CD4+,CD8+细胞在鼻息肉组织中表达的情况: 鼻息肉组织中可见大量CD4+,CD8+细胞,分布特点:其分布呈丛集性,多集中在上皮下和腺体血管周围,而在间质中则呈较均匀散在分布。CD4+细胞数明显多于CD8+细胞数(图3,4,5,6)。 1.1鼻息肉组织上皮下、腺体血管周围CD4+细胞数(51.46±28.88、41.89±29.98)与对照组上皮下、腺体血管周围CD4+细胞数(19.20±18.44、13.09±14.06)有显著性差异(P<0.01)(表1,2)。 1.2鼻息肉组织上皮下、腺体血管周围CD8+细胞数(26.32±19.43、21.04±16.76)与对照组上皮下、腺体血管周围CD8+细胞数(16.30±15.73、12.83±12.36)有显著性差异(P<0.05)(表1,2)。 1.3鼻息肉组织上皮下、腺体血管周围CD4+/CD8+细胞数比值(1.96±0.181.99±0.19)与对照组CD4+/CD8+比值(1.18±0.151.02±0.15)有显著性差异(P<0.01)(表1,2)。 1.4鼻息肉组织中上皮下、血管腺体周围CD4+细胞数分别为51.46±28.88、41.89±29.98,之间无显著性差异(P>0.05)(表4)。 1.5鼻息肉组织中上皮下、血管腺体周围CD8+细胞数分别为26.32±19.43、26.32±19.43,之间无显著性差异(P>0.05)(表4)。 1.6鼻息肉组织中上皮下、血管腺体周围CD4+/CD8+细胞数比值分别为1.96±0.18、1.99±0.19,之间无显著性差异(P>0.05)(表4)。 2CD4+和CD8+细胞在对照组组织中表达的情况: 对照组中大部分切片可见CD4+和CD8+细胞,但数量很少,有的切片甚至未见CD4+和CD8+细胞,CD4+和CD8+细胞亦主要集中在腺体血管周围,呈散在分布(图7,8,9,10)。CD4+/CD8+比值为1.18±0.15。(表1,2)。 3CD4+,CD8+细胞在鼻息肉患者外周血中表达的情况: 鼻息肉患者外周血中可见大量CD4+,CD8+细胞,分布特点:CD4+细胞明显多于CD8+细胞(图11,12)。 3.1CD4+细胞数为38.90±6.56与对照组CD4+细胞数25.08±4.74有显著性差异(P<0.01)。 3.2CD8+细胞数为29.36±4.96与对照组CD8+细胞数17.48±3.94有显著性差异(P<0.01)。 3.3CD4+/CD8+细胞数比值1.95±0.12与对照组CD4+/CD8+细胞数比值1.43±0.13有显著性差异(P<0.01)(表3)。 4在对照组外周血中表达的情况: 对照组中CD4+,CD8+细胞数较少(图13,14),CD4+/CD8+细胞数比值1.43±0.13(表3)。 结论:本研究结果显示CD4+,CD8+细胞在鼻息肉组织中和外周血中表达明显增多,且CD4+明显多于CD8+细胞。CD4+细胞数,CD8+细胞数及CD4+/CD8+与对照组均有显著性差异,表明鼻息肉的发生与T淋巴细胞免疫失衡有关。T-辅助细胞是免疫应答中核心淋巴细胞,通过抗原递呈细胞(antigenpresentingcell,APC)的加工处理,使T辅助细胞得以识别和活化,CD4+细胞增多,释放多种相关细胞因子,细胞因子又通过相互间网络系统的调控作用从而使各种炎细胞聚集、增殖和激活,发挥局部抗炎作用,但由于抗原作用的持久性,使局部炎症反应长期存在,呈慢性改变,在发挥抗炎作用的同时又造成了组织的损伤和演变,最终导致鼻息肉的形成。 深入研究T淋巴细胞与鼻息肉的相关性,探讨T淋巴细胞介导的免疫反应在鼻息肉中所起的作用,为鼻息肉根治提供理论依据。
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