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目的：利用人体外周血来源的树突状细胞(dendritic cells, DCs)强大的抗原提呈能力和激活T细胞尤其是初始型T细胞的能力,探讨转染人甲状腺髓样癌细胞系总RNA的DC疫苗体外诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)增殖和杀伤靶细胞的效率。方法：采集正常志愿者抗凝的新鲜外周血,应用淋巴细胞分离液(Ficoll)用贴壁的方法分离单个核细胞(PBMC),经重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素4(rhIL-4),体外诱导培养获取未成熟DC(imDC)。从甲状腺髓样癌细胞系提取总RNA后转染DC,流式细胞仪检测转染前后DC表面CD83, CD86, CD11c, CD14及HLA-DR表型的变化；同时经重组人白细胞介素2(rhIL-2)诱导扩增T淋巴细胞,转染后的DC与自体T淋巴细胞混合,刺激T淋巴细胞得到肿瘤抗原特异的细胞毒性T淋巴细胞(CTL),流式细胞仪检测刺激前后CD3/CD4, CD3/CD8的变化。MTT法检测致敏DC对T淋巴细胞增殖的影响和致敏DC活化的特异性CTL对甲状腺髓样癌细胞系总RNA转染的DC的体外杀伤效率。结果：提取甲状腺髓样癌细胞系总RNA,电泳显示完整未降解。体外诱导人外周血单个核细胞,流式细胞仪检测显示：未加脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)培养的DC低表达CD83, CD86, CD11c,为未成熟DC,符合转染要求；加LPS或甲状腺髓样癌细胞系总RNA培养的DC,高表达CD83, CD86, CD11c,为成熟DC,其形态典型、具备强烈刺激增殖的能力。转染后DC刺激自体T淋巴细胞5天后,CD8+的CTL比例上升(P<0.01)。甲状腺髓样癌细胞系总RNA致敏DC刺激T淋巴细胞转化为CTL后,MTT法检测其对新转染甲状腺髓样癌细胞系总RNA的DC细胞的杀伤效应,结果表明：随着效靶比增加,其杀伤效应亦显著增加(P<0.01)。结论：甲状腺髓样癌细胞系总RNA转染DC后,可促进其成熟,并有效刺激T淋巴细胞增殖为具有杀伤能力的抗原特异性CTL,进而发挥其杀伤癌细胞的作用,为甲状腺髓样癌RNA疫苗的体内试验提供了依据。