Bax抑制肽对缺氧缺血性脑损伤大鼠心肌细胞的保护作用

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目的:1.观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时心肌细胞Bcl-2、Bax等凋亡相关因子的表达情况。2.探讨Bax抑制肽对缺氧缺血性脑损伤大鼠心肌细胞凋亡的保护作用。  方法:健康7日龄Wistar大鼠,雌雄不限,共75只,平均分为三组:对照(Control)组、HIBD组、BIP组,每组按时间点分为12h、24h、48h、72h、7d五个亚组。Control组:实施颈部手术,暴露左侧颈总动脉,但不结扎,不进行缺氧处理,BIP组:手术结扎左侧颈总动脉,缺氧处理后,0.5h内给予BIP(80μL,5mg/mL)腹腔内注入,HIBD组:与BIP组同样处理动物后给予80μL生理盐水腹腔内注入,三组分别于缺氧后12h、24h、48h、72h、7d时间点处死动物取脑及心脏进行各项指标的检测。2.观察指标:TUNEL法检测脑细胞及心肌细胞凋亡;SP法检测Bcl-2、Bax、Cyt-C、Caspase-9等凋亡因子的表达情况;Western blot法检测Caspase-3的表达。  结果:1.与Control组比较,HIBD组、BIP组出现脑细胞凋亡;2.与Control组比较,HIBD组在48h、72h时间点心肌细胞凋亡明显(P<0.01);与HIBD组比较,BIP组在48h、72h时间点心肌细胞凋亡均显著下降(P<0.01),BIP组与Control组比较,各时间点心肌细胞凋亡均无明显差别;3.心肌细胞Bcl-2、Bax、CytC、Caspase-9等凋亡相关因子的表达:与Control组比较,HIBD组、BIP组各时间点Bcl-2、Bax、CytC、Caspase-9的表达均显著升高(P<0.05),12h开始升高,72h达高峰,7d仍高于正常。与HIBD组比较,BIP组各时间点Bax表达差别不显著(P>0.05),但是Bcl-2、CytC、Caspase-9在24h、48h、72的表达均显著下降(P<0.05)。4.Western blot法检测Caspase-3的表达:与Control组比较,HIBD组、BIP组Caspase-3蛋白表达量较高,12h开始升高,72h达高峰,7d接近正常;与HIBD组比较,BIP组各时间点Caspase-3表达减少。  结论:1.新生大鼠窒息后有心肌细胞凋亡;2.BIP能减少心肌细胞凋亡,对新生大鼠缺氧缺血性心肌凋亡有一定的保护作用。
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