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目的:气体信号分子硫化氢参与多种病理生理过程。在心血管系统,硫化氢发挥心脏保护、血管调节和抑制动脉粥样硬化发生的作用。最近的研究证实HMGCo A还原酶抑制剂阿托伐他汀增加了肾脏和其他器官中硫化氢水平。然而,其内在的机制并不明确。在本研究中,我们研究并比较三种不同的他汀氟伐他汀、阿托伐他汀和普伐他汀对巨噬细胞内硫化氢水平的调节,并探讨其可能的分子机制。方法:以小鼠巨噬细胞raw264.7为工具细胞株,以三种具有不同理化性质、临床常用的不同浓度的他汀类药物氟伐他汀(脂溶性,1.25,2.5,5,10μM)、阿托伐他汀(脂溶性,10,25,50,100μM)和普伐他汀(非脂溶性,25,50,100μM)分别作用不同时间(24、36、48小时)。分别以经典的亚甲蓝法和特异性荧光探针WSP-1检测培养上清和细胞内硫化氢水平;以定量PCR和western blotting检测硫化氢合成酶胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和巯基丙酮酸硫转移酶(3-MST)的m RNA和蛋白表达;利用NADH的氧化联合乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞内CSE活性;以si RNA干扰敲减cse基因;以western blotting检测细胞内Akt磷酸化水平变化;采用定量PCR测定细胞因子IL-1β和MCP-1m RNA表达。结果:三种他汀都会随着浓度的增加而降低细胞的活力。选择以不产生明显细胞毒性作用的2.5μM氟伐他汀、50μM阿托伐他汀和普伐他汀观察比较其对巨噬细胞中硫化氢水平的影响,发现氟伐他汀和阿托伐他汀可以显著增加细胞内、外的硫化氢水平,而普伐他汀却没有显著作用。氟伐他汀和阿托伐他汀呈时间和剂量依赖性地增加硫化氢合成酶CSE的m RNA和蛋白表达;但是这两种他汀均不影响另一个硫化氢合成酶3-MST的m RNA和蛋白表达。而且,2.5μM氟伐他汀处理48小时后CSE活性增加4.4倍。C SE抑制剂炔丙基甘氨酸(PAG)和CSE的干扰RNA(si RNA)能够显著降低氟伐他汀引起的硫化氢水平的增加。另外,氟伐他汀作用后15分钟,巨噬细胞内Akt磷酸化水平即显著增加,于1-3小时达高峰,6小时开始下降。PI3K抑制剂LY294002和Akt特异性抑制剂perifosine可以逆转氟伐他汀引起的CSE表达上调和硫化氢水平的增加。最后,我们发现氟伐他汀预处理可以减少细菌脂多糖诱导的促炎细胞因子IL-1β和MCP-1的表达;而CSE抑制剂PAG可以逆转氟伐他汀的该作用。结论:在巨噬细胞中,亲脂性他汀氟伐他汀和阿托伐他汀能够通过上调CSE的表达及活性而促进硫化氢的产生,从而发挥抗炎症作用,而非脂溶性的普伐他汀没有这种作用。Akt信号通路介导了氟伐他汀对CSE表达及硫化氢生成的促进作用。胱硫醚-γ-裂解酶/硫化氢通路可能是他汀抗炎作用的另一个作用机制。