Toll-样受体4在人肿瘤细胞发生和转移中的作用研究

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癌细胞的转移,是肿瘤治疗失败并最终导致死亡的重要原因。研究显示,人前列腺癌细胞PC3,DU145,LNcaP具有不同的转移能力,并且TLR受体表达于前列腺瘤细胞生长,浸润和迁移过程中。前列腺的转移性和TLR4之间有没有相关性呢?   为了确认TLR受体在三株细胞中是否存在表达差异,我们首先采用了RT-PCR,WB,免疫荧光技术分别比较了上述三种不同迁移能力的前列腺癌细胞中TLR4表达情况。结果显示,三株前列腺癌细胞TLR4表达存在显著差异,PC3表达最高,LNcaP细胞基本不表达,DU145介于两者之间。同时,我们运用了基底膜侵袭试验,来探究这三株前列腺癌细胞转移能力,结果显示,PC3具有高转移性,LNcaP细胞基本不转移,DU145转移性介于两者之间。   TLR表达差异与转移能力的协同性,是否说明前列腺癌的浸润转移与TLR4相关呢?为了证实这一推论,我们选择了TLR4高表达高转移的PC3细胞作为进一步研究对象。我们首先构建siRNA表达载体了,通过siRNA干扰体外培养的肿瘤细胞系TLRs-4表达。WB、细胞免疫荧光等检测显示siRNA干扰显著抑制TLRs-4基因mRNA和蛋白的表达。基底膜侵袭试验分析表明PC-3细胞TLRs-4基因沉默后,显著抑制肿瘤细胞的侵袭和转移。进一步MTT检测干扰后结果显示,细胞的活力减弱,增殖能力降低。   体外研究结果显示,TLR4的表达与前列腺癌细胞转移密切相关,运用siRNA直接靶向TLRs能后有效的抑制肿瘤细胞的转移,具有应用到临床肿瘤的治疗中的潜在价值。
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