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2-苯乙醇是一种具有柔和玫瑰花香味的芳香醇,天然存在于植物的叶、花和果实中。作为香料被广泛应用于食品、化妆品和洗涤产品等领域。其衍生物也是玫瑰香型主要组分。随社会发展生活水平提升,人民更加注重“天然”和“绿色”的产品。化学合成的高纯度食用级别2-苯乙醇有限,植物萃取工序繁琐价格昂贵,导致市场2-苯乙醇供不应求。利用作用条件温和及环境友好型微生物转化合成天然2-苯乙醇具有重要的研究价值和市场前景。本论文对从奶酪中筛选出的高产2-苯乙醇菌株的最适转化合成2-苯乙醇培养条件及菌株固定化进行了研究,研究内容如下:(1)高产2-苯乙醇酵母的筛选对从新疆传统奶酪中分离纯化的酵母进行2-苯乙醇耐受性考察及产量测定,筛得一株2-苯乙醇耐受性最好产量最高的酵母,命名为1,能于4 g/L2-苯乙醇固体平板上生长,2-苯乙醇产量达2.51 g/L,经分子生物学方法鉴定为库德里阿茲威氏毕赤酵母Pichia kudriavzevii 1。乙醇产量为18.86 mL/L,与2-苯乙醇协同对酵母的抑制作用不明显。(2)酵母产2-苯乙醇发酵条件优化通过单因素试验和响应面分析确定产2-苯乙醇的最佳条件为:葡萄糖70 g/L、酵母浸1 g/L、L-苯丙氨酸6.2 g/L、磷酸二氢钾4 g/L、硫酸镁0.8 g/L,温度30℃、装样量50 mL/L和接种量1.2×10~7个/mL,该条件下培养24 h菌株转化合成2-苯乙醇量为3.53g/L,比最初2.51 g/L提升了40.64%。(3)产2-苯乙醇酵母细胞固定化条件优化通过单因素试验和正交试验优化了以海藻酸钠为载体包埋酵母细胞的条件,最适固定化条件为:海藻酸钠3%、氯化钙1.2 mol/L、酵母菌体浓度1.2×10~8个/mL及固定化时间2 h。此条件下固定化颗粒转化合成2-苯乙醇的量为3.32 g/L。以发酵24 h为一个周期,通过分批反复发酵发现于含50 mL转化液的250 mL的锥形瓶在30℃150 r/min条件下。固定化细胞前3批2-苯乙醇的量均在3 g/L以上,第9批仍能合成1.5 g/L以上的2-苯乙醇,明显优于游离态细胞。