罗非鱼是我国水产养殖业中主要的经济鱼类。近年来罗非鱼疾病的爆发频率增高,其中罗非鱼链球菌病最为严重。抗生素类等药物无法预防疾病,且易使链球菌株产生耐药性。中草药免疫增强剂具有毒副作用小、环境友好、残留低、多功能等优点,因此寻找能有效预防罗非鱼链球菌病的绿色中草药免疫增强剂已成为防治重点。本研究考察了黄芩水提液对罗非鱼无乳链球菌病的预防效果,同时考察其生物活性成分。将黄芩提取液以1:100的比例（干药草/干饲料,w:w）拌入饲料中,连续饲喂健康罗非鱼28 d。分别在3、7、14和28 d取样,考察黄芩提取液对罗非鱼头肾白细胞ORBA和吞噬活性、血清的酸性磷酸酶（ACP）、溶菌酶（LZM）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）;按1%的生药含量将黄芩提取液拌料连续投喂罗非鱼7和14 d,以半数致死剂量浓度的无乳链球菌人工感染罗非鱼,考察其对无乳链球菌病的预防效果;并将黄芩提取液使用超高效液相色谱（UPLC-QEMS）进行了鉴定。结果表明,在黄芩提取液拌料连续投喂罗非鱼的作用下,可显著提高罗非鱼头肾白细胞的ORBA和吞噬活性,血清中ACP、LZM和SOD活性,IL-8和hsp70 m RNA的表达水平,无乳链球菌感染的相对保护率分别为90.5%和63.6%。使用UPLC-QE-MS对黄芩提取液进行分析鉴定,共鉴定出802种植物化学成分,这些化合物可能在提高罗非鱼免疫力和抗病能力方面发挥重要作用,但需要进一步的研究来证实这一推断。采用转录组测序技术对黄芩提取液拌料连续投喂7 d的罗非鱼脾脏进行高通量测序分析,构建罗非鱼脾脏转录组数据库,研究其特异性免疫相关基因及信号通路。通过对差异表达基因进行GO功能注释和KEGG富集分析后发现,免疫系统相关差异基因共有69个,主要集中于信号传导通路、免疫系统通路上。对这些通路进行进一步挖掘,得到引起自然杀伤细胞介导细胞毒性（Natural killer cell mediated cytotoxicity）通路上基因差异表达的有11个,其中信号传导淋巴细胞激活分子家族（SLAM）受体表达显著上调,基因差异表达最为显著的基因为SLAM家族成员Ly-9基因。本研究结果表明黄芩提取液可有效地预防罗非鱼无乳链球菌病,其生物活性成分可以进一步开发为候选免疫增强剂;Ly-9基因可能是黄芩提取液对罗非鱼免疫增强作用中的潜在调控基因,为进一步揭示黄芩提取液对罗非鱼免疫增强作用机制提供了一个新的研究方向。