济宁青山羊子宫内雌激素受体(ERα、β)和孕激素受体(PR)的定位及其mRNA表达的增龄性变化

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shanwq1983
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济宁青山羊是中国优质的地方山羊品种,也是世界上优良的种质资源。因青山羊性成熟较早,高繁殖力,四季均可发情,遗传性稳定,适应性强,肉质细腻、鲜美等优良特性而深受广大人民的青睐。母羊初情期一般始于60日龄,90~120日龄即性成熟。为探讨济宁青山羊出生当天至180日龄雌激素(E)和孕激素(P)含量的变化规律,雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)和孕激素受体(PR)在子宫中的分布和表达规律,本试验用放射免疫分析法检测济宁青山羊出生当天至180日龄血清中雌激素和孕激素的含量;用SABC免疫组化法检测ERα、ERβ和PR免疫阳性细胞在不同试验组济宁青山羊子宫中的分布;以GAPDH为内参基因,qRT-PCR法对生后发育不同时期济宁青山羊子宫中ERα、ERβ和PRmRNA表达规律进行研究。放射免疫分析法结果显示:济宁青山羊出生当天至180日龄均能检测到E和P,血清中E含量出生时最多,30日龄显著下降(P<0.05),虽在90日龄和180日龄分别出现两个峰值,但60~180日龄期间变化不大(P>0.05);血清中P浓度在出生时较高,此后迅速下降,30~90日龄期间无显著变化(P>0.05),120日龄骤然上升,与150无显著变化(P>0.05),180日龄显著上升(P<0.01)。ERα、ERβ免疫组化和qRT-PCR结果显示:ERα、ERβ阳性染色主要见于子宫的腔上皮细胞、腺上皮细胞、血管内皮细胞、基质细胞和肌层平滑肌细胞的细胞核中,偶见胞质阳性着色;ERα、ERβ阳性细胞平均光密度在出生当天至30日龄处于低水平(P>0.05),60日龄(初情期)开始上升,90日龄达到高峰(P<0.05),150~180日龄维持在一个高水平状态,ERα mRNA的表达量在出生当天至30日龄处于低水平,60日龄开始上升,120日龄(性成熟)达到高峰,而后其表达量处于高水平状态。ERβ mRNA的表达量在出生当天至30日龄也处于低水平,60日龄开始上升,90日龄达到高峰,此后维持在一个高水平状态。ERα和ERβ阳性细胞光密度与其mRNA表达趋势基本一致,但ERβ低于ERα。PR免疫组化和qRT-PCR结果显示:PR阳性染色主要见于子宫的腔上皮细胞、腺上皮细胞、基质细胞和肌层细胞的细胞核中,偶见胞质阳性着色,180日龄在腺上皮细胞可见PR阳性细胞大量分布;PR平均光密度出生当天较高,而后急剧下降,在30日龄处于最低水平(P<0.05),60日龄(初情期)明显升高,120日龄(性成熟)出现第一个高峰,150日龄略微降低(P>0.05),180日龄(性成熟之后)出现第二个高峰;PR mRNA从出生当天到90日龄的表达量较低,且各个年龄组间差异不显著(P>0.05),PR mRNA的表达量在120日龄和180日龄出现两个高峰(P<0.01)。PR平均光密度与其mRNA的相对表达量变化趋势基本相同。结果显示:生后发育过程中,子宫中的E、P以及ERα、ERβ和PR的规律性变化对阐明济宁青山羊性发育和性早熟的内分泌机制提供支撑材料。
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