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HLA-G是非经典的HLA I类分子之一，其有限的基因多态性及限制性的组织分布，提示它是一种诱导免疫耐受的分子。临床上免疫抑制剂的大量使用，在缓解移植排斥反应的同时也抑制了机体的免疫系统，使患者处于罹患感染的风险之中，因此，诱导同种异体免疫耐受成为了目前亟待解决的问题。大量体外研究资料显示，HLA-G可以通过与抑制性受体，如ILT-2/4等结合，诱导T、B、NK、DC、巨噬细胞等免疫细胞的免疫耐受[1-6]。临床移植研究也显示，HLA-G阳性受者较HLA-G阴性的受者，其急性排斥期短，慢性排斥发生率也低[7-9]。研究显示，HLA-G二聚体在体外能有效抑制同种T细胞的应答作用，但其在体内的研究相对较少。本研究利用混合淋巴细胞培养模型，在体外研究了HLA-G二聚体对同种反应性T细胞的作用；利用“人-鼠”异种GVHD模型，初步探讨了HLA-G二聚体在体内的作用；同时我们还利用“人-鼠”异种GVHD模型，探讨了雷帕霉素在该模型中的作用。论文的主要内容与结果如下：一、可溶性HLA-G二聚体可诱导同种T细胞耐受为了进一步研究可溶性HLA-G二聚体抑制同种反应性T细胞的作用，本研究选用Tyr368-376肽，将其加载至T2细胞表面，利用加载了Tyr肽的T2细胞与HLA-A2阴性的淋巴细胞混合培养，这个过程中加入可溶性HLA-G二聚体进行干预，混合培养七天之后收集细胞，通过流式细胞学技术进行检测和分析。结果显示：可溶性HLA-G二聚体可抑制T细胞活化，抑制同种CD8+细胞分泌IFN-γ，促进同种CD8+细胞分泌IL-4，但对同种CD8+细胞分泌TGF-β无影响。二、可溶性HLA-G二聚体不能改善模型鼠的GVHR症状和延长其生存时间基于可溶性HLA-G二聚体在体外能诱导同种T细胞耐受，为了进一步丰富可溶性HLA-G二聚体在体内相关数据，我们建立了“人-鼠”异种GVHD模型，探讨其在体内的作用。结果显示：可溶性HLA-G二聚体不能改善模型鼠的GVHR症状，也不能延长其生存时间。随后我们发现在异种混合培养中，第七天时CD56+有明显的增殖，且在加入可溶性HLA-G二聚体之后这一增殖更加明显，但CD3+和CD14+细胞没有观察到明显增殖；单用CD56+细胞也不能导致异种GVHR的发生，但去除PBMC中的CD56+细胞后，模型鼠的生存时间得到了显著延长。综合上述实验结果，我们可以确定，CD56+细胞在异种混合培养中起关键作用，是异种GVHR发生的导火索。三、雷帕霉素改善模型鼠GVHR症状伴随MDSCs的增多mTOR是一种非典型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，为磷脂酰肌醇激酶相关激酶蛋白质家族成员之一，是细胞生长及发育中的一种关键激酶，是雷帕霉素的靶向分子[10-14]。雷帕霉素是由吸水链霉菌生产的大环内酯类，最初获得关注是其具有免疫抑制作用。在我们的研究中，我们利用“人-鼠”异种GVHD模型以及与GM-CSF联用，分别从体内和体外对雷帕霉素进行了研究。结果显示：在体内，雷帕霉素可以改善模型鼠GVHR症状并伴随MDSCs的增多；在体外，雷帕霉素与GM-CSF联用，可以诱导PBMC中MDSCs的增多。