论文部分内容阅读
背景:胃癌是当今严重威胁人类生命健康的重大疾病之一,世界范围内其发病率位居肺癌、乳腺癌和肠癌之后,每年新发病例约934 000人,而其死亡率则位于癌症死因的第二位,每年约为700 000人,我国的胃癌发病人数更占到世界总发病人数的40%以上。近年研究提示,Wnt信号通路成分的突变和表达异常往往会促进肿瘤细胞转化、生长、侵袭转移和血管生成。分泌型蛋白DKK1是Wnt信号通路中一种重要的调节因子,其在肺癌、食管鳞癌、肝癌等多种肿瘤中表达异常,但与胃癌的关系有待进一步研究。本论文从mRNA表达水平和蛋白表达水平研究DKK1在胃癌组织、血清中的表达及含量,有助于进一步了解胃癌发生发展的分子机制,有利于寻找新的胃癌血清学诊断指标。方法:收集河北大学附属医院2007年3月至2009年6月间对胃癌患者施行的手术切除后标本40例,其中胃癌组织标本25例,癌旁组织标本(癌旁3~5 cm外)15例,标本均取自术前未接受放、化疗的胃癌患者。血清样本由保定市肿瘤医院和河北大学附属医院于2008年1月至2009年8月间采集的血液制备,病人血液在未经手术切除和放化疗前抽取。我们用半定量逆转录-聚合酶链式反应技术(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)方法检测胃癌组织及癌旁组织中DKK1 mRNA表达和蛋白表达水平;使用酶联免疫(ELISA)方法分析癌症病人血清和正常人血清中DKK1蛋白含量。并用相应生物统计学软件比较组间差异。结果:RT-PCR和Western blot结果显示,与对照组癌旁组织相比,DKK1 mRNA和蛋白表达水平总体无差异,但在胃癌组织中表达水平离散程度较高,部分胃癌组织中DKK1表达量明显上升,部分胃癌组织中表达量明显下降。而ELISA结果则显示胃癌患者血清中DKK1含量为4.471μg/L(0.885-23.829μg/L),明显低于正常人血清的5.015μg/L(1.705-8.384μg/L),P<0.01,在95%置信区间内,当取含量值为3.5390μg/L为参考值时,有61.8%的胃癌患者低于此值,而只有15.8%的正常人低于此值,其诊断敏感性为61.8%,特异性为84.2%。结论:胃癌患者肿瘤组织中DKK1 mRNA及蛋白表达水平与癌旁组织无明显差异,但血清中DKK1含量则比正常人显著降低,提示DKK1可能在胃癌发生发展早期发挥主要作用。同时胃癌患者癌组织中DKK1表达和血清含量水平离散程度高,一些胃癌组织中DKK1 mRNA与蛋白表达量显著上升,一些胃癌组织中表达量明显下降,提示其表达水平的改变可能对肿瘤组织分型、TNM分期、淋巴结转移等胃癌病理指标更加敏感。胃癌患者血清中DKK1含量明显降低,其诊断敏感性为61.8%,特异性为84.2%,从而有成为胃癌血清学诊断指标的潜在价值。