第三代二膦酸盐(伊班膦酸钠)对正畸源性根吸收的作用研究

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错(?)畸形与龋病、牙周病一样,也是口腔科常见病、多发病,其发病率甚高。它不仅影响咀嚼、语言等功能,还会影响美观,妨碍社交和个人的身心健康成长。随着社会的发展,人们生活质量的提高,以及口腔医学知识的推广普及,人们对美的追求越来越高,对错(?)畸形矫治的需求也就越来越大。正畸通过对错位牙齿和颌骨施加矫治力可以矫治绝大部分错(?)畸形,改善患者面型,因此越来越受到患者青睐。但是正畸机械矫治力在移动牙齿的同时不可避免的会诱发不同程度的牙根吸收,可直接影响治疗效果及牙齿的健康。近年来,二膦酸盐(bisphosphonates, BPs)类药物对口腔医学特别是正畸学的影响引起了口腔医学界的重视。二膦酸盐是焦磷酸盐(pyrophosphate, PPi)的同型物,因其可选择性抑制破骨细胞的活性,过去常被用于治疗过度骨吸收导致的骨代谢性相关疾病:如Paget疾病、骨髓瘤和骨质疏松等。而正畸矫治力作用下牙周组织的改建也涉及到破骨细胞,因此国内外很多学者对二膦酸盐在正畸领域的应用做了大量研究,但多数集中在二膦酸盐对正畸牙移动的研究上。伊班膦酸钠(Ibandronate)是第三代二膦酸盐的代表药物,是骨吸收的强力抑制剂。由于破牙骨质细胞与破骨细胞在形态和功能上极其相似,伊班膦酸钠是否会抑制或减轻正畸源性根吸收的发生呢?本实验研究在建立大鼠正畸牙齿移动动物模型的基础上,结合牙齿移动距离、破牙骨质细胞的数量、破骨细胞分化因子(osteoclast differentiation factor,ODF)的表达和牙根吸收程度,探讨伊班膦酸钠对正畸源性根吸收的影响,从而为正畸临床预防牙根吸收提供参考。目的:通过观察牙齿移动距离的差异、牙周组织中破牙骨质细胞的数量变化、ODF的表达以及牙根吸收程度的差异,研究伊班膦酸钠对大鼠正畸源性根吸收的作用。方法:选取48只SPF级雌性Wistar大鼠,建立大鼠正畸牙齿移动模型,设置自身对照,实验侧为伊班膦酸钠注射侧,对照侧为对侧未打药侧。在大鼠双侧上颌第一磨牙与上切牙之间安装一0.012英寸镍钛拉簧,施加力量控制在60g左右,所有大鼠均于安装矫治器前三天在实验侧(大鼠上颌左侧)移动牙齿近中腭侧黏骨膜下局部注射50μ1伊班膦酸钠,同时对照侧注射50μ10.9%生理盐水。每三天注射一次直至实验结束。实验第3、7、14天时各处死16只大鼠,其中随机选择8只用作牙周组织的组织学切片观察,另外8只用作牙根吸收情况的扫描电镜(Scanning electron microscopy, SEM)观察。前者大鼠被处死后,分离大鼠头颅骨,用游标卡尺(精确度0.02mm)测量上颌双侧第一磨牙牙齿移动的距离,并制备大鼠第一磨牙及其周围牙周组织切片,利用HE染色观察两侧牙周组织形态变化及破牙骨质细胞的数量,利用免疫组化染色检测ODF在牙周组织中的表达,并采用图像处理软件对两侧的牙根吸收指数进行分析;后者大鼠被麻醉后完整拔出双侧上颌第一磨牙,进行扫描电镜样本制备,电镜观察牙根表面吸收陷窝的情况,之后大鼠再被处死。结果:1.成功建立了大鼠正畸牙齿移动动物模型。2.牙齿移动距离随着实验时间的延续而逐渐增加,实验侧和对照侧的牙齿移动均呈现先上升后平缓再上升的趋势,即0-3天阶段大鼠牙齿快速移动,3-7天阶段牙齿移动呈现平稳状态,7-14天牙齿又发生快速移动,并且实验侧牙齿移动距离增加幅度小于同期对照侧。在实验第3天,实验侧大鼠的牙齿移动距离小于对照侧,但差异无统计学意义(P>0.05);实验第7天和14天,实验侧的牙齿移动距离均小于对照侧,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.从组织切片上可以看出,实验侧和对照侧大鼠第一磨牙压力侧牙周膜间隙缩窄,牙周膜纤维排列紊乱,牙槽骨和牙根表面均出现蚕食状的吸收陷窝,陷窝内可见多核巨细胞聚集。在实验第3天,牙根表面吸收陷窝内可见破牙骨质细胞,但不明显,实验侧和对照侧之间没有显著性差异(P>0.05);实验第7天和14天,实验侧的破牙骨质细胞数量均小于对照侧,差异具有统计学意义(P<0.05)。并且实验侧多数破牙骨质细胞发生了细胞核数量增多等不同于正常细胞的形态变化。4.实验侧第3天、7天和14天大鼠第一磨牙牙周组织压力侧ODF阳性表达程度均低于对照侧,其中实验第7天和第14天两侧的差异具有统计学意义(P<0.05)。实验侧和对照侧的ODF阳性表达主要定位于破骨细胞内,其中细胞质内和细胞膜上均可见ODF的阳性表达。5.实验侧第3天、7天和14天牙根吸收指数均小于对照侧,牙根吸收程度均比对照侧轻。其中实验第3天时,两侧的牙根吸收都很轻微,吸收程度没有显著差异(P>0.05);实验第7天和第14天两侧的吸收程度差异具有统计学意义(P<0.05)。6.扫描电镜示,实验第3天,实验侧和对照侧的牙根表面均较光滑,质地均几乎未见吸收陷窝;实验第7天,两侧均见不规则形状的吸收陷窝,其中对照侧吸收陷窝数量较多、范围较广,实验侧吸收陷窝数量少,面积小;实验第14天,两侧的吸收陷窝数量均较实验第7天增多,实验侧较之对照侧吸收陷窝数量少、面积小。结论:1.局部应用伊班膦酸钠可以减缓正畸牙齿移动的速度。2.局部应用伊班膦酸钠可以减少牙周组织压力侧破牙骨质细胞的数量,减弱牙周组织中ODF的表达。3.局部应用伊班膦酸钠可以抑制正畸矫治过程中根吸收的发生。伊班膦酸钠的应用为临床预防正畸源性根吸收提供了新的思路。
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