壮药锡叶藤质量标准研究

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目的:①对锡叶藤进行鉴定研究。  ②锡叶藤中总黄酮含量测定和挥发油检测的研究。  ③锡叶藤药材水分、灰分、浸出物等检查指标的限量研究。  ④锡叶藤叶药材的HPLC指纹图谱研究。  ⑤初步建立锡叶藤药材质量标准。  方法:①分别采用原植物鉴定、性状鉴定、显微鉴定与理化鉴定的方法对锡叶藤进行鉴定研究。  ②采用紫外-可见分光光度法(UV-Vis法),以芦丁为对照品,以三氯化铝溶液显色剂进行显色,对锡叶藤药材进行总黄酮含量测定方法研究;采用气质联用色谱法(GC-MS法)对锡叶藤进行挥发油检测;  ③按《中华人民共和国药典》2010年版一部附录中的测定方法,进行锡叶藤药材水分、灰分、浸出物等检查指标的限量研究。  ④建立锡叶藤叶药材的HPLC指纹图谱:以汉黄芩素的色谱峰作为参照峰,对不同产地的锡叶藤叶药材进行HPLC指纹图谱的分析。  ⑤参照《广西中药材标准》制订了锡叶藤的药材质量标准草案和起草说明。  结果:①锡叶藤种子有流苏状似碗的假种皮,药材根茎表皮有龟裂痕,叶有沙质状手感。在显微方面,根的射线细胞内含有淀粉粒,皮层有大量粘液细胞散在,叶上、下表皮均有硅质化非腺毛等特征。供试品薄层色谱中,在各产地色谱相应的位臵上,根、茎、叶样品均分别显相同颜色的黄绿色荧光斑点,各成分均能较好地分离,斑点清晰。紫外-可见光鉴定方面,根氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、石油醚、无水乙醇提取液在207.0~247.0 nm与272.0~280.0 nm附近特征峰吸收较大,茎各溶剂提取液在271.0~318.0 nm附近特征峰吸收较大,叶石油醚、乙醇、乙酸乙酯溶剂提取液在208.0~2470.0 nm附近特征峰吸收较大,氯仿、正丁醇、石油醚溶剂提取液在332.0~263.0 nm附近特征峰吸收较大,可作为紫外-可见吸收光谱鉴别峰。红外图谱相关系数根在0.9859~0.9805范围内,茎的相关系数集中范围主要是0.9858~0.9808,叶的相关系数集中范围主要为0.9934~0.9917,0.9884~0.9857,0.9784~0.9738三个等级。  ②化学成分的预实验,表明壮药锡叶藤根、茎、叶药材中均可能含有糖、多糖、苷类、鞣质、有机酸、黄酮类、酚类等化学成分,茎中还可能含有香豆素、内酯等。根、茎、叶总黄酮含量分别在3.74%~8.48%、2.91%~7.09%、3.32%~5.09%之间,按照含量平均值6.11%、5.00%、4.21%适当下浮20%为4.88%、4.00%、3.36%,且大多数根、茎、叶样品含量分别大于5.0%、5.0%、4.0%,因此建议锡叶藤根、茎、叶药材中的总黄酮含量分别不应低于5%、5%、4%。锡叶藤根药材挥发油成分匹配度大于80的共有8个峰,占各产地总挥发油成分的62.65%~96.00%,平均为79.5%;茎药材挥发油成分匹配度大于80的共有11个峰,占各产地总挥发油成分的66.87%~91.45%,平均为83.0%;叶药材挥发油成分匹配度大于80的共有19个峰,占各产地总挥发油成分的68.72%~82.72%,平均为73.5%。  ③锡叶藤根、茎、叶药材水分含量分别不得超过13.0%、11.5%、11.5%;总灰分含量分别不得超过13.0%、11.0%、18.5%;酸不溶性灰分含量分别不得超过1.0%、0.8%、10.5%;水溶性浸出物含量分别不得低于9.0%、7.0%、11.0%。  ④建立了锡叶藤叶HPLC指纹图谱:检测波长为320nm,梯度洗脱,在100min内记录药材的指纹图谱。HPLC指纹图谱标定了12个共有特征峰,10个批次的锡叶藤叶中,其中5个产地的锡叶藤叶相似度大于0.9。  结论:①本文提供了原植物鉴定、性状鉴定、显微鉴定与理化鉴定等方法的结果均对锡叶藤药材具有鉴定意义。  ②锡叶藤总黄酮的含量测定方法和挥发油的检测所用方法简便、准确,为锡叶藤药材的质量标准的制定提供参考。  ③水分、灰分、浸出物等检查指标的限量为锡叶藤药材的质量标准的制定提供依据。  ④HPLC指纹图谱的建立,为锡叶藤叶药材的质量标准的制定提供实验依据。  ⑤建立了锡叶藤药材质量标准的基本体系,为锡叶藤药材的质量控制提供依据。
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