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背景与目的脑卒中是目前三大致死性疾病之一,具有高发病率、高死亡率、高致残率的“三高”特点,严重影响人的生存质量并给家庭和社会带来沉重负担。脑卒中分为缺血性卒中和出血性卒中,缺血性卒中占脑卒中的80%以上,尽早恢复血流是治疗缺血性卒中的最佳方法,但再灌注后可以引起机制复杂的再灌注损伤从而加速细胞死亡。而凋亡被认为是脑缺血再灌注损伤过程中重要的机制之凋亡即程序化细胞死亡(PCD),目前主要有三条凋亡通路：线粒体介导的凋亡途径、死亡受体介导的凋亡途径和内质网途径,其中线粒体通路起着重要作用。线粒体凋亡途径中包括caspase依赖的和非caspase依赖的,其中有多种蛋白酶自线粒体释放促进凋亡。乌司他丁属于蛋白酶抑制剂,对胰蛋白酶、纤溶酶等多种酶有抑制作用,另具有稳定溶酶体膜,抑制溶酶体酶的释放,抑制心肌抑制因子产生,清除氧自由基及抑制炎症介质释放的作用,多应用于胰腺炎和肺部疾病的治疗,近年有根据其抗氧化和抗炎机制应用于脑血管病的治疗报道,但其对细胞调亡方面的其体作用机制仍不清楚。本研究应用线栓法建立大鼠中动脉局灶性缺血再灌注模型,腹腔注射乌司他丁,通过检测病变侧皮层细胞色素C(Cyt c)、凋亡诱导因子(AIF)表达和凋亡细胞数的变化,探讨乌司他丁在脑缺血再灌注大鼠细胞凋亡中的作用和可能机制。材料与方法健康雄性清洁级SD大鼠54只,质量250-300g,随机分成假手术组、脑缺血再灌注组(对照组)、脑缺血再灌注十乌司他丁治疗组(治疗组),每组18只大鼠。采用改良Zea-Longa线栓法建立大脑中动脉局灶性缺血模型,假手术组不插线,对照组及治疗组缺血2h后再灌注。治疗组于再灌注的同时腹腔注射乌司他丁20000IU/kg,对照组和假手术组以同等剂量的生理盐水替代。再灌注24h采用免疫组化法检测大鼠脑组织Cyt c表达,采用RT-PCR法检测大鼠脑组织AIF表达,采用Tunel法检测大鼠脑组织凋亡细胞数。所有数据均采用均数±标准差(x±S)表示,采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析,两组间比较采用单因素方差分析,P<0.05具有统计学意义。结果1.乌司他丁对脑缺血再灌注大鼠脑组织细胞色素C的影响假手术组、对照组及治疗组大鼠脑组织皮质区细胞色素C阳性细胞数(个/HP)分别为3.20±0.75、98.40±7.28和74.80±3.37,对照组及治疗组与假手术组相比细胞色素C阳性细胞数明显增多,差异均具有统计学意义(P<0.05),而治疗组细胞色素C阳性细胞数低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.乌司他丁对脑缺血再灌注大鼠脑组织AIF的影响假手术组、对照组及治疗组大鼠脑组织皮质区AIF相对表达量(OD值)分别为0.126±0.023、0.433±0.075和0.186±0.0320,对照组及治疗组与假手术组相比AIF相对表达量明显增高,差异均具有统计学意义(P<0.05),而治疗组AI相对表达量低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.乌司他丁对脑缺血再灌注大鼠脑组织凋亡细胞数的影响假手术组、对照组及治疗组大鼠脑组织凋亡细胞数(个/HP)分别为6.60±1.02、48.60±4.32和28.40±53.32,对照组及治疗组与假手术组相比凋亡胞数明显增多,差异均具有统计学意义(P<0.05),而治疗组凋亡细胞数低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.脑缺血.再灌注后可以引起受损侧脑组织凋亡细胞数的增加和Cyt c、AIF表达的增高，说明Cyt c和AIF参与了脑缺血再灌注损伤。2.乌司他丁可以减少凋亡细胞数和下调受损侧脑组织中Cyt c和AIF的表达,其抑制凋亡作用可能与减轻线粒体损伤和抑制线粒体调亡通路相关。