原花色素(proanthocyanidin，PA)具有很强的抗氧化能力，其清除自由基的能力分别为VE的50倍和Vc的20倍。儿茶素类物质既是PA的构成单位，也是PA聚合的启动单位，在PA的形成中具有重要的作用。花色素还原酶(anthocyanidin reductase，ANR．)的主要作用是将花青素、花葵素、花翠素等前体物质转化为相应的儿茶素类物质。因此，ANR在原花色素的生物合成过程中起重要作用。 以本实验室自主选育的高EGCG茶树品系“1005”为材料，采用RACE的方法获得了茶树ANR的全长cDNA序列，扩增其开放阅读框，构建了pET-28a-ANR重组子在BL21中表达，SDS-PAGE电泳检测融合蛋白。具体结果如下： 1．获得了茶树花色素还原酶基因全长cDNA序列：用Trizol试剂从茶树嫩芽中提取总RNA，根据不同植物花色素还原酶基因同源性较高的区域设计保守区引物，利用RT-PCR技术获得茶树花色素还原酶基因的保守序列。然后，根据测序结果设计引物扩增该基因的3、-和5、-端序列。拼接的全长cDNA序列(1260bp)通过DNAman推断其氨基酸序列。推断的氨基酸序列与茶树花色素还原酶，葡萄花色素还原酶，茶树无色花色素还原酶的一致性分别为99％，84％和83％。 2．原核表达：设计茶树花色素还原酶基因开放阅读框的上、下游引物，扩增其开放阅读框，与pET-28a进行体外重组，然后在大肠杆菌BL21中表达，SDS-PAGE检测融合蛋白大小。结果表明，获得了高表达的预期大小(约45kDa)的融合蛋白。