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目的:通过研究CAⅡ在胃癌与乳腺癌组织表达情况,阐述CAⅡ在参与胃癌与乳腺癌的发生及转移的作用。为肿瘤的基因诊断及基因治疗打下理论基础。
方法:1.收集牡丹江医市第一人民医院自2001年7月-2004年3月的手术切除胃癌标本33例,年龄47-81岁,平均64岁、其中男性18例,女性15例,所有患者手术前均未接受化疗,放疗或其他针对肿瘤的治疗。术后病理诊断均为胃癌。组织学分型:乳头状腺癌19例,管状型腺癌9例:粘液型3例,未分化型共2例。分化程度:中低分化型14例:低分化、未分化型共19例。淋巴结转移:有淋巴结转移共19例,无淋巴结转移共14例,选取5例正常胃组织做对照。所有标本均用10﹪中性甲醛溶液固定,常规石蜡。收集牡丹江医市第一人民医院自2001年7月-2004年3月的手术切除乳腺癌标本44例,导管原位癌9例,小叶原位癌2例,浸润导管癌24例,浸润小叶癌9例;淋巴结转移:有淋巴结转移共24例,无淋巴结转移共20例,选取5例正常组织做对照。所有标本均用10﹪中性甲醛溶液固定,常规石蜡。
2.免疫组化SABC法:常规石蜡包埋、切片,进行CAⅡ的免疫组化和苏木素—伊红染色。每张切片加入2滴或100ul新配制的DAB显色液,避光显微镜下控制染色观察,出现棕黄和黄色为阳性。
3.结果判断:在400倍显微镜下,每张载玻片计数5个视野,计数每个视野中癌细胞总数及CAⅡ阳性的癌细胞数。阳性癌细胞判定标准参照:CAⅡ阳性呈棕黄色细颗粒状均匀分布,主要分布于细胞膜和细胞质中,在低倍镜(X100)视野下选择阳性细胞密集区做为观察区域,在高倍镜视野下(X400)观察,据阳性细胞数目,将CAⅡ表达分3组:阳性细胞0-24﹪为(一),阳性细胞25﹪-74﹪为(+),阳性细胞大于75﹪为(+,+)。
4.统计分析:采用SPSS11.0软件包进行统计学分析,计数资料用X2检验四格法,P<0.05为有显著差异,P<0.01为有高度显著差异。
结果:1.胃癌、乳腺癌和正常组织中CAⅡ的表达(1)CAⅡ在胃正常组织及间质内主要着色于细胞的胞浆,胞膜呈棕黄色,高倍镜4可见胞浆内有棕黄色颗粒.在胃癌组织中表达降低。
(2)CAⅡ在乳腺正常组织及间质内主要着色于细胞的胞浆,胞膜呈棕黄色,高倍镜可见胞浆内有棕黄色颗粒,在乳腺癌组织中表达降低。
(3)CAⅡ在癌组织中表达阴性率为80.51﹪,在正常组织中表达阳性率为100﹪。统计学分析CAⅡ在正常组织中表达有极显著差异(p<0.01)。
2.CAⅡ的表达与胃癌临床病理因素.(1)性别:胃癌中CAⅡ的表达与性别无显著差异P>0.05。
(2)组织学分型分三组进行比较:粘液癌及未分化癌的阴性表达率为100﹪,乳头状腺癌的阴性表达率为73.68﹪,管状腺癌的阴性表达率为55.5﹪。粘液癌及其它癌、管状腺癌与乳头状腺癌中CAⅡ的表达及表达程度统计学分析均有显著差异P<0.05。
(3)分化程度的二组比较:中.低分化程度组中阴性表达率为50﹪,低.未分化程度组中阴性表达率为84.21﹪。.在二组不同分化程度组织中CAⅡ的表达随着分化程度的降低而表达程度降低。统计学分析均有显著差异P<0.05。
(4).淋巴结转移分为两组进行比较:在有转移的胃癌中阴性表达率为73.68﹪,无转移的胃癌中阴性表达率为57.14﹪。且有转移的胃癌中CAⅡ的表达程度明显降低。有、无转移与CAⅡ的表达及表达程度统计学分析均有显著差异P<0.05
3.CAⅡ的表达与乳腺癌临床病理因素(1).组织学分型分四组进行比较:乳腺癌中CAⅡ的表达与导管原位癌和小叶原位癌均无显著差异(P>0.05)。但在浸润导管癌、浸润小叶癌中CAⅡ的表达程度统计学分析有显著差异。
(2).分化程度的二组比较:在二组不同分化程度组织中CAⅡ的表达随着分化程度的降低,而表达程度降低,统计学分析有显著差异(P<0.05)。
(3)淋巴结转移分为两组进行比较:乳腺癌有无转移与CAⅡ的表达程度统计学分析有显著差异(P<0.05)。
4.胃癌和乳腺癌的转移与CAⅡ的表达CAⅡ在胃癌、乳腺癌中的表达与淋巴结转移有关,当淋巴结有转移时CAⅡ表达程降低。
5.胃癌和乳腺癌的分化程度与CAⅡ的表达CAⅡ在胃癌、乳腺癌中的表达与分化程度有关,分化程度越低,CAⅡ表达程度5越减低。
结论:CAⅡ在正常组织中完全表达,在胃癌组织、乳腺癌组织中表达减少,提示癌组织中CAⅡ表达与癌组织的侵袭、转移和生物学行为有关,CAⅡ在抑制胃癌、乳腺癌发生、转移中发挥作用,为肿瘤的基因诊断及基因治疗奠定了理论基础。