肿瘤是机体在多种致癌因素作用下局部组织出现异常增生而形成的新生物,其中恶性肿瘤更是严重危害着人类的生命健康。中医认为肿瘤的发生大多与正气内虚、感受邪毒、七情抑郁和饮食损伤等因素有关,肿瘤的基本病机是脏腑功能失调、气滞痰凝和瘀毒博结;而治疗肿瘤常以扶正固本、行气活血为原则。扶正中药的品种很多,其中主要代表药物包括人参、黄芪、西洋参、党参等,这些药物均有不同程度的抗疲劳、抗应激、增强或调节机体免疫力以及保护机体造血功能等作用。黄芪具有强大的补气固表、利尿生肌和脱毒排脓等功能,然而黄芪中绝大多数活性成分的作用靶点和机制却并不清楚。环黄芪醇是皂苷类化合物黄芪甲苷的苷元,研究发现其具有多种药理作用,然而其是否通过免疫系统影响肿瘤的生长和作用靶标机制仍不清楚。在第一章中,我们回顾了目前关于环黄芪醇的多种药理作用研究,并详细介绍了蛋白质二硫键异构酶A1（PDIA1）的结构特征和功能基础,以及PDIA1在神经退行性疾病、心血管疾病、糖尿病、肿瘤和感染性疾病中的作用。在第二章中,我们发现环黄芪醇在体外细胞实验中并不直接杀伤结肠癌细胞CT26和MC38,并且能够促进小鼠脾脏细胞中CTL相关基因的表达。在随后的体内移植瘤实验中,我们也发现环黄芪醇能明显的抑制肿瘤的生长,并且流式结果分析发现环黄芪醇能够促进CD8 T细胞的浸润,并且增强CD8 T细胞中Gzmb、Prf1基因的表达;而在CT26的裸鼠移植瘤模型中发现环黄芪醇并不抑制其生长,因此我们认为环黄芪醇通过作用于CD8 T细胞来杀伤肿瘤细胞。在第三章中,为了探究环黄芪醇的抗肿瘤机制,我们采取label-free的技术寻找到了环黄芪醇的靶标蛋白PDIA1,并用热迁移和MST等手段验证了结合;通过分子对接技术发现了环黄芪醇和PDIA1的结合位点,并通过构建突变质粒验证了关键结合位点。我们又通过酶活力实验发现了环黄芪醇能够促进PDIA1的还原性酶活力,并且不以内质网应激的方式杀伤肿瘤。随后我们发现抑制PDIA1可以促进T细胞的激活,并用Co-IP结合质谱分析技术初步筛选出了PDIA1的互作底物蛋白。利用FDA批准上市药物分子库,我们又筛选出了29个候选的PDIA1别构抑制剂,通过差示扫描荧光技术我们验证了其中结合的化合物以备后续研究。综上所述,我们发现了环黄芪醇能促进CD8 T细胞对肿瘤的杀伤作用,并找到了环黄芪醇的靶标蛋白PDIA1和初步筛选出一系列潜在的PDIA1别构抑制剂。本研究通过对黄芪中活性成分环黄芪醇增强抗肿瘤免疫机制的阐释,为扶正中药黄芪用于抗肿瘤提供了科学依据。