论文部分内容阅读
目的 缺氧是常见的病理过程，它可导致缺氧性肺动脉高压，后者加重右心室负荷，是右心室肥大和高原心脏病发生的中心环节。关于缺氧性肺动脉高压的发生机制还不清楚，目前尚缺乏简便有效的防治措施。能量代谢障碍、氧自由基产生增多、细胞Ca2+稳态失衡、NO通路受损是缺氧损伤中相互联系相互促进的生化过程。针对这些过程，我们设想采用综合措施从增加NO产量、清除自由基、减轻Ca2+超载、加强细胞保护这些方面入手，进行治疗性实验研究。维C是血浆中能力最强的抗氧化剂，可中和100％的氧自由基；牛磺酸具有调节细胞内钙稳态及良好的细胞保护功能；L-精氨酸能提高NO的产量。为此，我们选择了L-精氨酸、牛磺酸和维生素C（ViTA：vitamin C／taurine／L-arginine formulation）在整体动物和细胞培养缺氧模型上进行了探讨，期望这三种药物的联合运用可以抗缺氧损伤，提高抗脂质过氧化能力，从而保护细胞、提高细胞依赖的NO产量，从而达到较好的对肺动脉高压和右心室肥大达到较好的防治效果。 方法 1．雄性Wister大鼠分为常氧对照组、缺氧2周、缺氧4周两大组，缺氧组又分为缺氧对照（H）、维C（V）、牛磺酸（T）、L-精氨酸（L）、维C+牛磺酸（TV）、牛磺酸+L-精氨酸（TL）、L-精氨酸+维C（VL）、维C+牛磺酸+L-精氨酸（TVL）治疗组，各组分别给予相应的维C（1g／kg）、牛磺酸（2g／kg）、L-精氨酸（1g／kg）口服治疗。缺氧组在模拟高原5000米每天12小时，分别于缺氧2周、4周后在模拟高原4000米低压舱内测量肺动脉压和心功能，取血浆、肺组织测定血浆乳酸脱氢酶、脂质过氧化产物丙二醛（MDA）、肺匀浆NO含量，取心脏测定右心室肥大指数。2．培养大鼠肺动脉平滑肌细胞，将细胞分为常氧培养组及缺氧12、24、48小时组，缺氧组置于2％O2环境培养，用MTT法测定细胞活力，观察上述不同药物及其组合对细胞的缺氧保护作用。 结果 1．药物组合对缺氧大鼠抗缺氧损伤和肺动脉高压的防治作用 肺动脉压：缺氧2H、4H大鼠出现显著的缺氧性肺动脉高压，其平均肺动脉压较平原对照组约高出25 mmHg（P＜0.01）。而各治疗组都能降低缺氧所引起的肺动脉压升高，其中缺氧2周TVL组的效果最好，肺动脉压的控制情况优于其它各治疗组，较缺氧未治疗组第三军医大学硕士学位论文低8.8 mmH…g，其他各组间无显著差异（P<0.05）;缺氧4周各治疗组显著低于4H组（P<0.05），各治疗组间无显著差异。右室重量指数:单纯缺氧ZH、4H组右室重量指数都高于平原对照组P<0.01，分别是平原对照组的1 .56、1.63倍。各治疗组都分别低于相应的单纯缺氧组20%左右（P<0.01），各治疗组内无区别。乳酸脱氢酶:缺氧ZH、4H大鼠血浆乳酸脱氧酶活性显著高于平原对照组，分别比平原对照组高10.1倍和7.5倍印<0.001);缺氧ZH各治疗组都能显著降低乳酸脱氢酶的活性印<0.001)，尽管仍低于平原对照组（P<0 .01），但与单纯缺氧2周H组相比较，乳酸脱氢酶活性分别降低24.4%一49.2%，其中Tv、TL组分别显著低于T、V组（P<0.05），TVL组显著低于其他各治疗组（P<0.001）;缺氧4周各治疗组除TL组外都能显著降低乳酸脱氢酶的活性印<0 .001)，尽管仍低于平原对照组伊<0.01)，其中TVL组显著低于除v外的各治疗组P<0.01;缺氧ZH显著高于缺氧4H组口<0，01)。MDA:模拟500om海拔缺氧ZH、4H大鼠血浆MDA含量显著高于平原对照组，分别是平原对照组的1 .64、1.32倍（P<0.01），4H组的MDA值显著低于ZH组的MDA值（P<0 .01）;缺氧2周各治疗组都能显著降低MDA值口<0.01)，其中TvL组的MDA值显著低于其他各治疗组（P<0 .01），与正常对照已无显著差别印>0 .05)，其他各治疗组间无显著差别（P>0.05）;缺氧4周各治疗组都能降低MDA值（P<0 .01），与正常对照已无差别，但各治疗组间无差别。肺匀浆N0含量:ZH、4H组大鼠肺匀浆NO含量显著降低，分别为平原对照组的犯%和35%印<0 .001)，二组之间无显著差异;缺氧2周、4周各治疗组的变化基本一致，除了T、V组外，L、TV、TL、VL、TVL各组显著高于相应的缺氧不用药组（P<0.001），但低于平原对照组（P<0、01），TVL、TV、TL、VL组间无明显统计学差异，但显著高于L组（2周组P<0.01，4周组P<0.05）。 2.单纯缺氧对肺动脉平滑肌细胞的影响 缺氧12、24小时对细胞活力呈抑制效应，约降低17.5%（P<0.001），而缺氧48小时细胞活力增高14.1%（P<0.001）;常氧情况下药物及其组合对细胞活力无显著影响;缺氧12小时，各治疗组抗缺氧抑制的能力都高于单纯缺氧组（P<0.001），其中单独用药组比联合用药各组抗缺氧能力更强（P<0.001）;缺氧24小时，各治疗组都显示出了抗缺氧抑制的效果（P<0.001），除T、V、TV组高于其他组外（P<0.001）;缺氧48小时，除L组外，各治疗组抗缺氧增殖的能力都高于单纯缺氧组（P<0.001），TVL组作用最强，抗增殖能力高于其他各组（P<0.001）。 结论: 上述结果表明: 1.牛磺酸、维生素C、L精氨酸及其组合具有抗缺氧损伤、抑制脂质过氧化、增加 7第三军医大学硕士学位论文NO产量、减轻缺氧性肺动脉高压和右心室肥大程度的效应，药物联用具