银杏叶提取物为银杏科植物银杏(Ginkgo biloba L.)的干燥叶的提取物,为黄棕色的细粉末,味苦而涩,具有活血、化瘀、止痛、通络的功效,主要用于血瘀、哮喘和高血压高血脂等症状。银杏保健茶属于保健功能的茶叶,其制作过程是用红茶作基茶,然后将银杏叶提取物加水调配至茶叶中,不仅能使原茶叶外观、风味不变而且能使红茶叶的营养更加丰富,能起到比红茶更为理想的的保健作用,具有改善大脑的记忆力、清除氧自由基、改善脑部血液循环的作用,由于其副作用较小,可长期食用。其质量控制未见研究报道。本研究采用HPLC-DAD-IT/MSn及HPLC-DAD技术对银杏保健茶的质量控制进行研究,具体内容如下:一、银杏保健茶HPLC-DAD指纹图谱研究建立了适用于银杏保健茶质量控制的HPLC-DAD指纹图谱分析方法。样品用水加热回流提取后蒸干,再用50%的甲醇复溶,提取液采用高效液相色谱-二极管阵列检测器进行指纹图谱分析。色谱柱采用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.5%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min。选择320 nm波长色谱图进行指纹图谱研究,28个共有峰在126 min内得到良好分离。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版》对11批银杏保健茶样品进行相似度分析,11批银杏保健茶相似度均在0.985以上,表明银杏保健茶的产品质量稳定性很好。该方法可靠、稳定、高效,可有效地用于保健茶的质量控制。二、HPLC-DAD-IT/MSn法鉴定银杏保健茶的化学成分通过HPLC-DAD-IT/MSn技术定性分析银杏保健茶水提取物中的主要化学成分。采用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,并以乙腈-0.5%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,液质仪柱后分流比为7:3。质谱采用ESI源,正负离子模式扫描采集数据。通过分析正负离子质谱图信息,并结合相关的文献以及参照9个对照品数据,最后鉴定出了银杏保健茶水提取物中的47个化合物。借助高效液相的高效的分离能力以及质谱检测器的高灵敏度优势,建立了基于HPLC-DAD-IT/MSn的定性分析方法,为控制银杏保健茶的质量、稳定其保健效应及阐释其作用机制提供了科学依据。三、HPLC-DAD-IT/MSn法鉴定银杏保健茶血中移行成分建立一种全面快速地鉴定银杏保健茶血中移行成分的分析方法。采用HPLC-DAD-IT/MSn法,对比银杏保健茶、空白血清、银杏保健茶SD大鼠血清总离子流图,质谱碎片等信息,通过对比各色谱峰的色谱行为及质谱图裂解碎片,确定大鼠灌胃银杏保健茶后血中移行的成分。大鼠口服银杏保健茶后血中共发现18个入血成分,其中有5个化合物为银杏保健茶原形成分,13个化合物为原形药物的代谢产物。本研究将为阐明银杏保健茶保健效应的物质基础提供依据。四、高效液相色谱-串联质谱法同时测定银杏保健茶中的16种黄酮类功效成分建立了液质联用(LC-MS/MS)法同时测定银杏保健茶中16种黄酮类物质,16种黄酮成分分别为儿茶素、牡荆素、葛根素、大豆苷元、水飞蓟宾、槲皮素、木犀草素、芹菜素、柚皮素、橙皮素二氢查尔酮、山柰酚、橙皮素、异鼠李素、黄芩素、川陈皮素、桔皮素。实验优化了液相分离条件和质谱参数。采用C18色谱柱分离,流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸)梯度洗脱,流速为0.25 mL/min,离子源采用电喷雾正离子,质谱检测模式为多反应监测(MRM)模式。16种黄酮类物质在各线性范围内内线性关系良好,相关系数均大于0.996,低、中、高3个添加水平的平均回收率在70.9%~100.0之间,相对标准偏差小于10%。通过研究发现其中9种黄酮物质含量较高,分别是:山柰酚、槲皮素、橙皮素、牡荆素、木犀草素、儿茶素、芹菜素、柚皮素、异鼠李素,占总量的99.6%,这9种物质可作为银杏保健茶的质量控制指标。本法简便、快速、准确可靠,可用于银杏保健茶的质量控制。