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该论文主要包括小麦中来源于表达序列标签的微卫星标记(EST-SSR)图谱的构建,及小麦抗白粉病基因Pml6的SSR标记鉴定和定位两部分.基于国际小麦作图群体Opata85×W7984亲本组合的F<,7>代重组近交系群体,利用国际公共数据库GeneBank中的小麦ESTs序列开发并设计EST-SSRs引物,通过Mapmaker软件将在作图群体间表现多态性的EST-SSR标记位点整合在已知小麦的6个染色体RFLP图谱上,加密了原遗传连锁图谱的分子标记密度.Pml6最初被定位在4A上,为了能有效利用抗性基因,该研究通过小麦近等基因系Pml6/北京837<*>7,及Pml6/辽10亲本组合的两个抗感分离群体的研究,发现了一对与抗白粉病基因Pml6紧密连锁的SSR标记,利用该标记将Pml6基因重新定位于小麦5B染色体上.主要内容包括:1.分析国际公共数据库中dbEST中的EST序列,从中筛选出包含SSRs的ESTs序列,用Primer3软件设计EST-SSR引物150对,再通过PCR扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳,对引物的退火温度、扩增片断大小、扩增产物特异性、背景深浅等特性进行了统计、分析.2.用Opata85和W7984亲本材料,从150个EST-SSRs引物中筛选出多态性引物15个;利用其F<,7>代重组近交系114株单株材料进行检测,通过软件作图将其分别定位在小麦第2、4、6染色体群上.3.对这些定位的EST-SSR序列在国际公共数据库中进行进行同源性比对和功能预测,发现有9个包含SSR的ESTs与某些功能基因序列具有很高的同源性.4.为了给Pml6找到连锁标记,用44对已定位于4A和5B染色体上的小麦微卫星引物对杂交组合Pml6/北京837*7的101株F2抗感分离群体进行SSR位点检测,结果筛选出2对SSR引物Xgwm335和Xgwm213的扩增产物在抗感个体间存在多态性.进一步分析表明,其与抗病基因Pml6连锁,遗传距离都约为24cM.5.为了寻找新的标记,另一个组合Pml6/辽10的分离后代F2的28个单株再次用来检测与Pml6基因连锁SSR标记,结果除Xgwm335和Xgwm213外无别的连锁标记发现,估算结果表明xgwm335和Xgwm213与Pml6遗传距离为15.4 cM、13.6cM.6.据此将抗白粉病基因Pmi6定位于小麦5B染色体,这与有些学者最初用单体法将其定位于4A的结论有所不同,结果有待于实验的进一步深入研究.