论文部分内容阅读
阿维菌素、伊维菌素和阿苯达唑是畜禽养殖过程中常用的抗寄生虫药物,不规范使用会造成动物产品中兽药残留超标,从而对消费者产生危害。目前,牛肉、鸡肉和鸡蛋中阿维菌素、伊维菌素、阿苯达唑及其三种代谢物残留同时检测的高效液相色谱-二极管阵列（High performance liquid chromatography-photo-diode array,HPLC-PDA）检测方法尚未见报道。本研究采用QuEChERS和液-液萃取（Liquid-liquidextraction,LLE）方法提取目标化合物,建立并优化了牛肉、鸡肉、鸡蛋（鸡全蛋、鸡蛋清、鸡蛋黄）中阿维菌素、伊维菌素、阿苯达唑、阿苯达唑砜、阿苯达唑亚砜和阿苯达唑-2-氨基砜残留同时检测的HPLC-PDA方法。主要研究结果如下:1.建立并优化了利用QuEChERS技术对牛肉和鸡肉中的阿维菌素、伊维菌素、阿苯达唑、阿苯达唑砜、阿苯达唑亚砜和阿苯达唑-2-氨基砜残留同时提取的方法。即样品中加入10mL乙腈,涡旋、振荡,再加入QuEChERS试剂（4g无水硫酸镁,1g氯化钠,1.5 g柠檬酸钠盐缓冲剂）,迅速涡旋、离心,收集上清液,经离心浓缩后用初始流动相复溶。使用该方法提取,六种目标化合物的回收率均大于85.10%。2.建立并优化了利用LLE技术对鸡蛋中的阿维菌素、伊维菌素、阿苯达唑、阿苯达唑砜、阿苯达唑亚砜和阿苯达唑-2-氨基砜残留同时提取的方法。即样品中加入提取剂溶液（乙腈:水,90:10,v/v）,经涡旋振荡、离心去沉淀,收集上清液,重复提取1次,合并上清液,离心浓缩至干后加入初始流动相复溶。应用此提取方法,六种目标化合物的回收率均在85.70%以上。3.建立并优化了牛肉、鸡肉和鸡蛋中阿维菌素、伊维菌素、阿苯达唑、阿苯达唑砜、阿苯达唑亚砜和阿苯达唑-2-氨基砜残留同时检测的HPLC-PDA方法。使用XBridgeTM C18色谱柱（4.6mm×150mm,5 μm）,以0.1%的三氟乙酸水溶液和甲醇为流动相,采用梯度洗脱的方式分离目标物,流速为1.0mL/min,柱温为30℃,阿苯达唑的检测波长为302.0 nm,阿苯达唑的三种代谢物的检测波长为288.0 nm,阿维菌素和伊维菌素的检测波长为244.0nm。研究结果表明:阿苯达唑、阿苯达唑砜、阿苯达唑亚砜、阿苯达唑-2-氨基砜和阿维菌素的添加浓度在定量限（LOQ）～600.0 μg/L、伊维菌素的添加浓度在LOQ～400.0μg/L范围内,目标物的峰面积与其浓度均呈现良好的线性关系,决定系数R2均高于0.999 0。在空白样品中添加浓度分别为LOQ、0.5 MRL、1.0 MRL和2.0 MRL时,空白牛肉和鸡肉中阿苯达唑、阿苯达唑砜、阿苯达唑亚砜、阿苯达唑-2-氨基砜、阿维菌素和伊维菌素的添加回收率分别为88.78%～93.43%、85.10%～93.27%、91.67%～96.64%、86.06%～94.42%、91.08%～95.04%、90.24%～96.10%,日内相对标准偏差（Relative standard deviation,RSD）分别为 1.47%～3.47%、1.44%～4.03%、1.52%～4.30%、2.47%～4.53%、1.99%～4.51%、1.83%～3.23%,日间 RSD 分别为1.81%～3.83%、1.89%～4.86%、1.68%～4.65%、2.65%～4.93%、1.95%～4.78%、1.35%～4.37%,检测限（LODs）分别为 9.8～12.5 μg/kg、8.3～9.0 μg/kg、3.6～4.2 μg/kg、3.3～4.0 μg/kg、8.7～8.8μg/kg、3.2～4.5 μg/kg,LOQ 分别为 28.6～30.0 μg/kg、24.1～26.5 μg/kg、10.2～12.0μg/kg、9.5～11.4 μg/kg、25.5～25.8 μg/kg、9.0～11.2 μg/kg;空白鸡蛋中阿苯达唑、阿苯达唑砜、阿苯达唑亚砜、阿苯达唑-2-氨基砜、阿维菌素和伊维菌素的添加回收率分别为88.91%～95.37%、87.76%～96.39%、89.96%～96.23%、90.13%～97.21%、85.70%～93.29%、87.79%～94.47%,日内 RSD 的范围分别为 1.49%～3.16%、1.29%～3.69%、1.62%～3.98%、1.76%～4.15%、2.14%～4.08%、1.44%～3.25%,日间 RSD 的范围分别为 1.32%～4.07%、1.74%～4.85%、1.66%～4.60%、2.06%～4.33%、2.71%～4.82%、1.70%～3.76%,LOD分别为 8.6～10.5μg/kg、6.0～7.8 μg/kg、2.1～3.2 μg/kg、2.8～3.6 μg/kg、7.9～8.6 μg/kg、2.8～3.5μg/kg,LOQ 分别为 25.0～28.4μg/kg、20.0～22.1 μg/kg、7.8～8.1 μg/kg、10.6～12.4 μg/kg、25.0～26.4μg/kg、9.5～11.4 μg/kg。该方法快速高效,为动物源性食品中阿苯达唑、阿苯达唑砜、阿苯达唑亚砜、阿苯达唑-2-氨基砜、阿维菌素和伊维菌素残留同时检测提供了新的检测方法。