不同温度下恩诺沙星及代谢物在黄颡鱼体内的药物代谢动力学和残留消除研究

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恩诺沙星(enrofloxacin,ENR)是一种广谱、高效、低毒抗菌药物,可预防和治疗水生动物的细菌性病原体感染,广泛应用于黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)的养殖中。但渔民在施药过程中缺乏科学的指导,往往凭借经验给药,导致药效下降和残留超标等现象。此外,水生动物是变温动物,水的温度是影响药效和代谢的重要因素,明确不同温度下药物在水产动物体内的药物代谢动力学(pharmacokinetics,PK)和残留消除规律,对指导科学用药和保障水产品安全至关重要。因此本文探讨了在不同温度下ENR及代谢物环丙沙星(ciprofloxacin,CIP)在黄颡鱼体内的PK和残留消除规律,为水产养殖用药提供一定的理论依据。在20、25和30℃水温下,对黄颡鱼单次口灌20 mg/kg鱼体重(B.W.)ENR,给药后0.17、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12、24、48、72、96和120 h采集血浆、自然比例带皮肌肉、鳃、肝和肾,血浆及组织经前处理后,运用高效液相色谱荧光法测定ENR和CIP的浓度,采用3P97软件基于非房室模型计算两个化合物的PK参数,比较不同温度下的PK参数。结果显示温度从20℃升高至25℃时,ENR在血浆及组织中的末端消除半衰期(T1/2?z)由52.93、61.20、51.34、51.61、56.85 h减小至16.62、23.86、14.28、16.24、19.57 h。然而,当温度从25℃升高至30℃时,ENR在血浆及组织中的T1/2λz增大至82.06、110.86、29.04、28.47、61.00 h。在20、25和30℃水温下分别于6、6、4 h观察到ENR的最大血药浓度(Cmax)为2.71、3.23、2.43μg/m L。三个水温下ENR在黄颡鱼体内的表观代谢率分别为25.74%~54.29%、37.10%~53.25%和22.62%~53.40%。结果表明,ENR和CIP在黄颡鱼体内代谢快且分布广,水温的升高会加快两个化合物的系统清除率(CL_F),显著影响T1/2?z、Cmax、达峰时间(Tmax)、药-时曲线下面积(AUClast)等重要参数。普遍认为只有游离的药物可以发挥药效,根据药物的血浆蛋白结合率(plasma protein binding,PPB)可以推测药物的游离或未结合浓度,从而制定更有效的给药方案。因此本研究在15、20和25℃孵育温度下,测定ENR和CIP浓度为1、5、10μg/m L时与黄颡鱼血浆蛋白的结合率。结果显示在15、20和25℃下,ENR和CIP的最低PPB分别为9.66±4.09%、13.52±4.74%、4.36±0.58%和4.39±1.03%、2.14±0.36%、13.36±0.96%。当ENR和CIP浓度为1、5和10μg/m L时,ENR和CIP的最低PPB分别为37.71±3.71%、17.29±0.69%、4.36±0.58%和24.22±0.91%、2.14±0.36%、7.04±1.36%。结果表明在相同温度下,ENR的PPB随着浓度的升高而降低。在相同温度和相同浓度下,CIP的PPB变化趋势都是先降低再上升。温度和浓度都对ENR和CIP的PPB产生了显著影响。在15、20和25℃水温下,对黄颡鱼以20 mg/kg B.W.连续三天口灌ENR,停药后第1、3、5、7、14、21、28、35、42、49、56、63和70 d采集血浆及组织,以上述相同方法处理和测定样品,使用WT1.4软件计算ENR在血浆及组织中的休药期。结果显示在15、20和25℃水温下,ENR在血浆及组织中的休药期依次为44、72、66、99、95 d;32、66、65、86、73 d;32、61、64、55、59 d。结果表明ENR在黄颡鱼血浆及组织中的休药期随着水温的升高而降低,以鱼可食性组织的休药期为标准,建议在15、20和25℃水温下休药期分别为72、66和61 d。
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