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目的本研究采用高强度聚焦超声(HIFU)辐照大鼠富含淋巴管的腹股沟区,观察辐照后不同时期,大鼠腹股沟淋巴管及周围组织的生物学变化,为临床应用HIFU治疗乳糜尿提供理论依据。方法1.32只SD大鼠,按辐照后不同观察时间随机均分为4组,每组8只,每只大鼠右侧腹股沟区为HIFU辐照侧,左侧为自身对照侧。2.用水合氯醛将大鼠腹腔注射麻醉后,行右侧臀部及腹股沟区脱毛并清洁,然后将大鼠以仰卧位固定在置于超声波源内自制的铁架上,大鼠臀部须浸没于脱气水中,通过机载B超探头将HIFU辐照的靶区定位于右侧后肢与躯干连接处的腹股沟区。3.HIFU辐照技术参数:焦域大小为3 min×3 mm×8mm,超声波发射功率300W,单元发射时间0.15 s,占空时间0.18 s,单点发射次数为50次,总时间为15 min,一天一次,连续两天。每次辐照后归笼饲养,并于第二次辐照后24小时,72小时,7天,30天分别解剖双侧腹股沟区,肉眼观察双侧腹股沟区组织的变化,然后取后肢与躯干连接处的大小为1.0cm×0.8cm×0.4cm的腹股沟血管神经束及周围组织,并横断为相同大小的两块标本,一块作冰冻切片,一块备用;同时取一块脾脏组织,用于做免疫组化阳性对照;三块组织用生理盐水纱布包好,放入-80℃超低温冰箱保存,待统一切片。4.所有冰冻标本均连续切片,片厚5μm,共3张,1张行常规HE染色,1张行LYVE-1免疫组化染色,1张以PBS液代替一抗作为阴性对照。根据试剂说明书,取已知LYVE-1蛋白阳性的大鼠脾脏切片染色作为阳性对照。5.HE染色及免疫组化染色观察到所取标本变化后,用备用的一块标本经脱水、固定、切片、染色等步骤行透射电镜观察其超微结构变化。结果1.HIFU能够透过皮肤靶向损伤淋巴管;适当功率的HIFU辐照大鼠腹股沟淋巴管后,24小时及72小时实验侧主要出现小血管充血、水肿、炎症细胞浸润、淋巴管管腔变形、破裂等急性损伤性改变,7天及30天后实验侧出现淋巴管数量减少、管腔闭塞、管周瘢痕形成等现象,而同一部位的大动、静脉血管无明显损伤性改变。2.HIFU辐照后不同时间组,实验侧淋巴管密度(LVD)均比自身对照侧明显减少。(P＜0.01)3.HIFU辐照后,随时间延长,实验侧LVD明显减少(P＜0.01);HIFU辐照后7天,LVD减少趋于稳定,此后随时间延长,LVD减少不显著(P＞0.05)。结论高强度聚焦超声能够靶向损伤大鼠腹股沟淋巴管,使其出现淋巴管破裂、管腔闭塞,管周组织瘢痕粘连等变化,而对大血管无明显损伤。