大白菜(Brassica campestris L. ssp. pekinensis)和结球甘蓝(Brassica oleracea var.capitata L.)是十字花科芸薹属重要的蔬菜作物,也是研究芸薹属A、C基因组起源、演化以及亲缘关系的重要材料。由于大白菜和结球甘蓝均属小染色体物种,相邻染色体形态又极为相似,不同染色体的识别存在很大困难。大白菜BAC文库的构建,为利用BAC-FISH技术鉴别结球甘蓝背景中的大白菜染色体提供了平台。基于此,本研究利用大白菜不同连锁群的SSR标记筛选大白菜BAC文库,并用筛选出的部分BAC克隆做探针在大白菜染色体上进行了BAC-FISH技术体系的初步探讨。同时,利用25S rDNA-FISH技术,分析结球甘蓝—大白菜1号、4号单体异附加系染色体上25SrDNA杂交信号分布及其在减数分裂过程中行为,揭示大白菜1号、4号染色体与结球甘蓝染色体的亲缘关系。主要研究结果如下:1.以50个一级混合池为模板,利用大白菜连锁群上特异SSR引物进行PCR扩增,A05、A06、A08、A10连锁群共筛到了18个阳性单克隆。其中,A05引物ENA17筛到了1个单克隆,引物ENA10筛到1个单克隆;A06引物ENA19筛到3个单克隆;A08引物BRMS-033筛到了6个单克隆;A10引物ENA18筛到了1个单克隆,B036L21-2筛到了6个单克隆。2.探讨了FAD的浓度、ssDNA的浓度对BAC-FISH杂交效果的影响,初步认为30%FAD、10%DS、2×SSC、探针1μg、1μg/μL ssDNA,得到的背景非特异性信号较少,其中91M11单克隆获得杂交信号,97D24,91M11克隆混合标记作为探针得到信号,91池M行混合克隆标记作为探针得到信号。3.对结球甘蓝—大白菜1号、4号单体异附加系进行了田间生殖生长时期性状调查。结果表明:与二倍体甘蓝亲本一样,CA1和CA4的生殖生长时期植株长势、分枝能力均非常强,叶片形状均为卵圆形,可育;但二者在植株高度、分枝角度、花蕾和花瓣大小、形状上表现出很大差异,CA4植株稍矮,花蕾为钝圆形,花浅黄色,花瓣平展,侧枝开展角度大;CA1花蕾瘦长、花色黄色,花瓣边缘呈微皱与亲本相同,侧枝开展角度较小,株型紧凑。4. 25S rDNA在CA1有丝分裂中期染色体上检出了5个杂交信号,其中4个信号位于结球甘蓝5号,9号染色体上,1个信号位于附加的1号大白菜染色体上;减数分裂终变期细胞中染色体多以9个二价体和1个单价体的形式存在,中期I大部分细胞中染色体均能正常排列在赤道板上。后期I染色体基本以10/9方式分离,后期Ⅱ基本上以10-9-10-9形式分离,个别细胞中出现后期I染色单体提前解离及后期Ⅱ染色体不同步分离等异常现象。5. 25S rDNA在CA4有丝分裂中期染色体上检出了5个杂交信号,其中4个信号位于结球甘蓝5号,9号染色体上,1个信号位于附加的4号大白菜染色体上;减数分裂终变期染色体的构型表现出多样性,有二价体、三价体、单价体和拟多价体。中期I单价体和二价体均排列于赤道板上,后期I基本以10-9形式分离,后期Ⅱ基本以10-9-10-9形式分离,杂交信号以3-2-3-2形式分离,个别以9-10-8-11形式分离,有一部分细胞中出现染色体分离不同步或不均衡现象。