【摘 要】
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目的: 本实验旨在通过体外分离、培养及鉴定大鼠骨髓基质细胞,研究甲基硫氧嘧啶对骨髓基质细胞增殖与凋亡的影响,为进一步探讨它对骨髓造血微环境的影响及作用机理提供理论
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目的: 本实验旨在通过体外分离、培养及鉴定大鼠骨髓基质细胞,研究甲基硫氧嘧啶对骨髓基质细胞增殖与凋亡的影响,为进一步探讨它对骨髓造血微环境的影响及作用机理提供理论依据。 方法: 1.体外分离、培养及鉴定SD大鼠的骨髓基质细胞,取对数生长期的细胞用于实验研究。 2.应用CCK-8法观察甲基硫氧嘧啶对骨髓基质细胞增殖的影响。 3.流式细胞术检测甲基硫氧嘧啶对骨髓基质细胞凋亡的影响。 结果: 1.通过全骨髓贴壁法得到贴壁生长,形态均一的单层细胞;流式细胞术检测显示CD90表达阳性、CD34与CD45表达阴性,鉴定成功。 2.CCK-8法检测结果显示:随着甲基硫氧嘧啶浓度增加与作用时间延长,增殖抑制作用逐渐增强。同一时间,从40mmol/L起,随着浓度增加,实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。同一浓度,随着作用时间延长,不同时间组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);与12h组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。作用48小时,对细胞增殖的抑制作用最强。 3.流式细胞术检测结果显示:从40mmol/L起,随着药物浓度的增加,细胞的凋亡率逐渐增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论: 1.全骨髓贴壁法成功获得SD大鼠BMSCs。 2.甲基硫氧嘧啶具有抑制骨髓基质细胞增殖和促进其凋亡的作用。 3.甲基硫氧嘧啶对骨髓基质细胞具有一定的细胞毒性影响。
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