马齿苋中水溶性吲哚啉类酰胺生物碱的化学成分研究

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本文采用优化的HPLC-DAD结合HPLC-ESI-MS/MS检测方法,并根据化合物的质谱碎片裂解规律,从中药马齿苋中发现并初步鉴定了12个吲哚啉类酰胺生物碱,其中8个为新化合物(马齿苋酰胺H-O),4个为已知化合物(马齿苋酰胺A-D);首次建立了基于吲哚啉类酰胺生物碱的马齿苋药材HPLC指纹图谱,同时测定了不同产地十一批马齿苋药材中马齿苋酰胺A (Oleracein A)和马齿苋酰胺(Oleracein B)的含量,分别为35.00-151.93 μg/g和40.00-150.44μ/g,以及总吲哚啉类酰胺生物碱的含量,分别为314.16-928.60μg/g(按OA计算)和475.83-1393.00μg/g(按OB计算)。为了确证马齿苋中水溶性新吲哚啉类酰胺生物碱的化学结构,我们采用聚酰胺柱色谱对马齿苋中吲哚啉类酰胺生物碱进行了富集,同时,结合ODS-C18、 Sephadex LH-20、MCI以及半制备HPLC等柱色谱分离方法对聚酰胺柱色谱洗脱流份进行分离,所分离得到的化合物根据NMR、MS、CD等谱图进行鉴定。我们从马齿苋中分离并鉴定了19个化合物,其中14个为吲哚啉类酰胺生物碱:马齿苋酰胺H(2S-5-羟基-1-对羟基肉桂酰基-2,3-二氢-1H-吲哚-2-甲酸-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷,1)、马齿苋酰胺Ⅰ(2S-5-羟基-1-阿魏酰基-2,3-二氢-1H吲哚-2-甲酸-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,2)、马齿苋酰胺N(2S-5-羟基-1-对羟基肉桂酰基-2,3-二氢-1H-吲哚-2-甲酸-6-O-[2-O-阿魏酰基-β-D-吡喃葡萄糖基]-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷,3)、马齿苋酰胺O(2S-5-羟基-1-阿魏酰基-2,3-二氢-1H-吲哚-2-甲酸-6-O-[2-O-阿魏酰基-β-D-吡喃葡萄糖基]-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷,4)、马齿苋酰胺K(2S-5-羟基-1-对羟基肉桂酰基-2,3-二氢-1H-吲哚-2-甲酸-6-0-[2-O-咖啡酰基-β-D-吡喃葡萄糖基]-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷,5)、马齿苋酰胺L(2S-5-羟基-1-阿魏酰基-2,3-二氢-1H-吲哚-2-甲酸-6-0-[2-O-咖啡酰基-β-D-吡喃葡萄糖基]-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷,6)、马齿苋酰胺P(2S-5-羟基-1-(对羟基肉桂酰基-7’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)-2,3-二氢-1H-吲哚-2-甲酸-6-O-β-D-毗喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷,7)、马齿苋酰胺Q(2S-5-羟基-1-(阿魏酰基-7’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)-2,3-二氢-1H-吲哚-2-甲酸-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷,8)、马齿苋酰胺R(2S-5-羟基-1-(对羟基肉桂酰基-7’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)-2,3-二氢-1H-吲哚-2-甲酸-6-O-[2-O-阿魏酰基-β-D-吡喃葡萄糖基]-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷,9)、马齿苋酰胺S(2S-5-羟基-1-对羟基肉桂酰基-2,3-二氢-1H-吲哚-2-甲酸-6-O-[6-O-阿魏酰基-β-D-吡喃葡萄糖基]-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷,10)、马齿苋酰胺A(11)、马齿苋酰胺B(12)、马齿苋酰胺C(13)、马齿苋酰胺D(14);4个为酚酸类化合物:(2R)-(+)-阿魏酰苹果酸酯(15)、对羟基苯甲酸(16)、阿魏酸(18)、对羟基肉桂酸(19):1个为香豆素类化合物:6,7-二羟基香豆素(17)。化合物1-10为新的吲哚啉类酰胺生物碱,化合物15、16从马齿苋中首次分离。另外,我们测定了14个吲哚啉类酰胺生物碱的DPPH自由基清除活性,并对其结构与清除自由基活性之间的关系进行了探讨。此外,本文利用HPLC法定性考察了吲哚啉类酰胺生物碱在新鲜采集的马齿苋属植物马齿苋(P. oleracea)、大花马齿苋(P. grandiflora)和马齿牡月(P. oleracea var. granatus)中的分布情况,以及该类生物碱在马齿苋茎和叶中的分布情况。通过比较新鲜马齿苋、马齿苋茎和叶、大花马齿苋、马齿牡丹的HPLC指纹图谱,初步发现马齿苋酰胺A、B、H、I四个主要的吲哚啉类酰胺生物碱为马齿苋的特征性化合物,且叶中的含量大于茎,实验结果为马齿苋属植物的植物化学分类学提供了部分理论依据。
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