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目前,利用蛋白质组学技术与方法开展多种恶性肿瘤的早期预警与辅助诊断研究已成为生物医学领域的热点与前沿,其优势就在于它可以动态观察一个完整的蛋白质或蛋白质亚型在特定的生理或病理状态下的发展变化,可以避免利用单一生物标志物所造成的假阴性与假阳性结果。
本研究利用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术,以患者血清为研究对象,对乳腺癌、卵巢癌及卵巢良性肿瘤、子宫内膜癌等妇科肿瘤患者的血清蛋白质组学变化进行了一系列研究,探索疾病组与健康组之间的特异性鉴别方法与特异性潜在肿瘤标志物。主要研究工作包括:1.优化了血清标本的采集和保存条件,比较筛选了适合本实验分离纯化条件的磁珠类型,经实验数据证明,MB-WCX型磁珠最适合本研究对象-血清样品的分离工作;2.通过对所建立方法的优化,保证了整个质谱检测体系的稳定性,使得所测定的质荷比漂移范围在误差范围允许之内,而其变异系数控制在30%的允许误差范围之内,为所获得质谱数据的稳定可靠奠定了基础;3.建立了乳腺癌与其健康对照的血清诊断模型,卵巢癌、卵巢良性肿瘤及其对照的血清诊断模型和子宫内膜癌及其对照的血清诊断模型,其灵敏度和特异性都表现良好,经未知样品的归属来进行诊断模型的验证,结果显示其诊断符合率均在90%以上;4.通过对其中差异蛋白质或多肽的统计分析,发现仅利用pk40,2212和pk90,4648这两个差异峰就可以把乳腺癌与子宫内膜癌组,卵巢癌与子宫内膜癌组完全区分,但是在区分乳腺癌和卵巢癌组的时候,效果不理想,有部分重叠或交叉;5.经过统计分析,乳腺癌、卵巢癌与子宫内膜癌组中共获得141个差异峰,有些在乳腺癌组中表达上调,如质谱峰pk32,1946.71;有些是在子宫内膜癌中表达上调,如质谱峰pk40,2212.14和pk36,2084.01;而绝大部分是在卵巢癌组中表达上调,如pk90,4647.73,pk140,9292.61,pk126,7768.87,pk135,8866.74,pk130,8132.93,pk136,8937.7,pk34,2023.89,pk96,5339.85,pk101,5907.9和pk102,5930.92。
总之,本研究工作中所发现的这些在疾病组与其健康对照组之间表达有明显差异的蛋白质或多肽,为进一步进行特异肿瘤标志物的鉴定与研究奠定了基础,通过未来对特异性质谱峰的鉴定,有望发现一组对妇科恶性肿瘤具有早期预警与诊断辅助价值的特异性生物标志物。