高良姜中二苯基庚烷的UPLC/Q-TOFMS分析及单体抗炎活性研究

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高良姜(Rhizoma Alpiniae Officinarum)主产于东亚,为姜科山姜属植物高良姜Alpinia officinarum Hance的干燥根茎,用于治疗脘腹冷痛、胃寒呕吐、嗳气吞酸等。天然线性二苯基庚烷类化合物广泛存在于姜科植物中,此类化合物结构典型,生理药理活性多样且显著,具有抗炎、抗血栓、镇痛、抗氧化、抗增殖等药理活性,近年来成为人们关注的热点。本实验采用气质联用、液质联用法对高良姜中的二苯基庚烷类化合物和黄酮类化合物进行了成分分析研究,结果表明由于二苯基庚烷类化合物具有低极性和热不稳定性的性质,导致在气质分析中发生化合物的裂解,因此不宜采用气质联用的方法进行此类化合物的成分分析。作为一种在线分析技术,液质联用法非常适合于此类化合物的分析并且可以提供快速准确的分析结果。本实验成功建立了鉴别高良姜超临界流体提取物中的二苯基庚烷类化合物和黄酮类化合物的液质联用方法,方法学验证表明本实验方法具有良好的超高效液相色谱重现性和质谱重现性,所有化合物分子离子峰的质量数误差均在5ppm以内,基于以下几个方面的综合分析:、化合物在正负离子模式下的质谱裂解途径、由仪器自带的Masslynx分析软件得到的化合物分子离子峰的元素组成、标准物质的质谱图、由保留时间推导出的极性大小信息,采用UPLC-Q-TOF MS/MS技术在正负离子模式下对高良姜超临界流体提取物中的二苯基庚烷类化合物和黄酮类化合物进行了鉴别。基于庚烷碳链上的取代基团不同,将二苯基庚烷类化合物分为六组不同的结构类型,每组化合物之间差别在于庚烷碳链上的取代基团不同,而每组中化合物的差别在于苯环上取代基团的不同。对这六类化合物的正负离子质谱裂解规律进行了详细的探讨,结合由保留时间推知的化合物极性大小的分析,我们将化合物进行了分类鉴别。结果我们从该提取物中鉴别出23个二苯基庚烷类化合物。还鉴别出了8个黄酮类化合物。其中三个黄酮类化合物为首次从该植物中发现。本实验采用半制备液相色谱制备出了三个二苯基庚烷类化合物,经鉴别其结构分别为:5-羟基-1-苯基-7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)- 3-庚酮、5-羟基-1,7-二苯基-3-庚酮、1,7-二苯基-4-烯-3-庚酮。考察了5-羟基-1-苯基-7-(4-羟基-3-甲氧基苯基)- 3-庚酮对raw264.7细胞系的抗炎作用机制,结果表明该化合物为潜在的环氧合酶2抑制剂。
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