目前分子检测手段有许多,诸如磁共振成像技术(MRI),计算机断层探测技术(CT)和正电子发射断层探测技术(PET)等经典成像技术,但这些技术不能直接并在实时尺度上监测许多生物现象。最近,荧光探针由于其可以以非侵入性方式进入活体内并可以进行光学成像而引起了相当大的关注。尽管荧光探针相较于放射物质灵敏度较低,但是与MRI、CT和放射性探针相比具有低成本、安全、容易操作等优点。脯氨酰氨肽酶(PAP)是特异性外肽酶,其催化肽和蛋白质的N-末端脯氨酸残基的水解。蛋白质水解是肉类发酵过程中的重要过程,导致产生小肽和游离氨基酸,这个过程影响食品口味与安全,进而影响人类健康。PAP在蛋白质消化,细胞凋亡和细胞增殖中起重要作用,因此脯氨酰氨肽酶(PAP)的检测对于人类社会生产生活是有重要意义和价值的。我们设计一种水溶性很好的荧光探针NIR-PAP,探针在与PAP接触后,在半胱氨酸和脯氨酸之间的肽键上作用,使肽键断裂,随后分子自发内环化并释放NIR荧光染料。探针与底物脯氨酰氨肽酶(PAP)反应后生成的荧光团是具有半花青近红外线染料的结构,其可以发射近红外荧光信号,所以,在做细胞成像实验时,它将具有深层组织穿透能力强,对生物样品的光致损伤最小等优势。因此探针NIR-PAP可以成为实时检测生物体内的脯氨酰氨肽酶(PAP)的有利工具。生命体内的硫醇,比如谷胱甘肽(GSH)、半胱氨酸(Cys)、同型半胱氨酸(Hcy),在生物系统中发挥着许多至关重要的作用。这些含硫化合物在生物系统中的代谢和转运与一系列重要的酶和蛋白质有关。这些硫醇的内源性浓度表明了相应酶和蛋白质的功能状态及其异常水平与疾病相关。我们设计一种以二氰基异佛尔酮染料为母体的荧光关-开探针DCI-Ac,丙烯酸酯作为反应位点,在半胱氨酸的作用下,丙烯酰基脱去,露出羟基,由于其有较强的给电子能力,可以和染料中的二氰基形成推拉体系结构,导致较强的ICT效应,荧光得以恢复。同时,我们又将探针用于细胞成像。