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目的:溃疡性结肠炎是一种特发于结肠的,以黏膜和黏膜下层浸润为主的慢性非特异性结肠炎症,属于中医学“泄泻”范畴。本病的病因和发病机制尚不十分明确,与易感基因、环境因素及免疫系统异常相关。但越来越多的研究表明该病与肠黏膜免疫屏障功效异常及其导致的肠粘膜免疫失衡相关。近年来,针对肠淋巴细胞归巢机制进行治疗的研究有了一定的进展,但这些药物引起的严重不良反应不得不使实验叫停。所以探寻高效、低毒的中药制剂成为研究热点。本课题的前期研究表明大黄与大黄主要成分大黄素、没食子酸分别与巴豆霜配伍,通过不同作用靶点减轻UC肠粘膜的病理损伤促进了损伤修复,该药对在UC大鼠的治疗中显示了良好的药效作用。大黄多糖是大黄的水溶性主要成分之一,具有多种生物活性,在大黄的药物活性中发挥着重要作用。为全面阐释大黄与巴豆霜药对对肠道黏膜免疫系统功能的影响,本研究拟以UC大鼠肠粘膜免疫屏障及肠淋巴细胞归巢的病变过程为靶点,通过大黄多糖不同剂量与巴豆霜配伍,探讨该药对是否通过干预肠淋巴细胞归巢,参与UC肠粘膜免疫屏障的保护或调节,以达到“止泻”功效的作用机制。方法:1.清洁级wistar雄性大鼠,应用TNBS+50%乙醇灌肠,建立稳定的UC大鼠模型。60只大鼠随机分为正常对照(N)、模型对照(C)、柳氮磺胺吡啶(Y)、及巴豆霜+大黄多糖(RHP)高(B+R80)、中(B+R60)、低(B+R40)三剂量共6组,每组各10只。造模三天后给予各组大鼠相应药物灌胃。2.以疾病活动指数(DAI)、结肠大体形态损伤指数(CMDI)、组织病理、脏器指数为指标,评价模型制备成功率并初步观察药物干预效果。3.连续给药7天后处死实验动物,留取抗凝全血及相关组织样本。采用流式细胞技术对UC大鼠外周血及结肠粘膜中CD3~+、CD4~+、CD8~+及CD4~+/CD8~+T淋巴细胞进行定量检测;采用RT-PCR法检测大鼠结肠粘膜病理组织中MAdCAM-1mRNA的表达;采用免疫组织化学法检测结肠组织中αLβ2、ICAM-1的表达。结果:1.大体形态与组织器官方面,C组大鼠DAI、CMDI、HS评分均明显高于N组(P<0.01),而胸腺指数显著降低(P<0.01),与模型组相比,用药组的DAI、CMDI评分呈有意义性下降(P<0.05);HS评分有不同程度的降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。三剂量组间比较,试验用药未见显著的量效关系,但DAI、CMDI及HS评分均以B+R40组下降趋势显著。2.流式细胞术结果显示,C组外周血T淋巴细胞亚群CD3~+、CD8~+数量显著低于N组(P<0.01、P<0.05),而CD4~+、CD4~+/CD8~+比值较N组明显上升(P<0.05,P<0.01),与C组相比较,用药组CD8~+水平升高CD4~+/CD8~+比值下降,且以B+R40剂量疗效最为显著。C组肠粘膜CD4~+、CD4~+/CD8~+比值较N组下降(P<0.01),药物干预后回升,其中以B+R40组效果显著。3.半定量RT-PCR显示,与N组比较,模型组MAdCAM-1mRNA含量显著升高,用药后,各组MAdCAM-1的表达呈下降趋势,其中B+R60、B+R40与空白对照表达相近(P>0.05)。各剂量组比较,B+R60、B+R40优于B+R80组,B+R组合比阳性药组下调MAdCAM-1表达水平更为显著。4.免疫组化染色结果显示,C组αLβ2、ICAM-1阳性表达较N组显著增多,(P<0.01),与C相比,B+R三剂量组ICAM-1阳性表达有意减少,B+R80、B+R40组αLβ2表达有意降低。结论:1.巴豆霜+大黄多糖药对可通过改善溃疡性结肠炎大鼠T淋巴细胞亚群比例减少淋巴细胞过度归巢来调节紊乱的免疫功能,减轻肠道炎症。2.巴豆霜+大黄多糖三剂量组都可通过降低特异性粘附分子的表达不同程度上抑制淋巴细胞归巢,减轻炎症反应,促进粘膜修复其中以低剂量组效果最佳。3.大黄多糖与巴豆霜组合是大黄、巴豆霜药对治疗溃疡性结肠炎的有效物质基础之一。