1.内腔镜监测仪在宫腔镜手术中的临床应用,2.石蒜碱诱导卵巢癌和乳腺癌细胞自噬、凋亡及侵袭转移的机制研究

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目的:目前在宫腔镜手术中灌流液的吸收量和出血量没有准确的监测方法,也没有提前预防TURP综合征发生的理想措施,这些仍然是临床的难题。通过在宫腔镜下子宫内膜电切术及粘膜下子宫肌瘤电切术中使用新研发的内腔镜监测仪,监测手术中的冲洗液吸收量和出血量,能对患者在术中是否发生并发症做出正确判断,并能及时处理,同时结合患者术前术后生化指标的变化,及时纠正患者的电解质平衡紊乱,为指导临床医师处理并发症提供了有效的依据。内腔镜监测仪有临床实用价值,值得临床推广。方法:内腔镜监测仪是采用压力传感器和光电传感器的原理,依据容量平衡法的原理研发而成的。该监测仪能精确测定出冲洗液总量、收集量、吸收量和出血量。选择兰大二院妇产科2015年10月-2016年12月就诊患有子宫内膜简单性增生、复杂性增生、内膜息肉的患者30例;子宫粘膜下肌瘤的患者30例,术中应用内腔镜监测仪监测手术时间、冲洗液总量、收集液总量、冲洗液吸收量和出血量;并对患者术前、术后1小时的心率、血氧饱和度、血常规和血电解质进行监测。数据进行统计学分析。结果:本研究60例宫腔镜下子宫内膜电切术及粘膜下肌瘤电切术的患者,手术过程顺利,均无并发症发生。通过内腔镜监测仪监测30例子宫内膜电切术中手术时间为18-47min,平均34.7±8.7min;冲洗液总量3164-8935ml,平均7134.7±1834.4ml;吸收量129-397ml,平均300.5±80.6ml;出血量20.9-57.9ml,平均34.4±9.9ml,而且术中膨宫压、内膜厚度以及宫腔深度与吸收量和出血量均有正相关性;并且吸收量、出血量与手术时间也呈正相关性;同时血Na~+浓度与手术前相比下降(P<0.05),而且手术时间大于40分钟后吸收量、出血量的变化与血Na~+浓度呈负相关性;监测30例子宫粘膜下肌瘤电切术中手术时间为31-70min,平均41.1±7.5min;冲洗液总量6116-14789ml,平均8552.0±1743.1ml;吸收量254-876ml,平均415.2±113.4ml;出血量65.8-188.9ml,平均101.0±24.0ml,而且术中膨宫压、肌瘤大小与吸收量和出血量均有正相关性;并且吸收量、出血量与手术时间也呈正相关性,即手术时间越长,出血量和吸收量越多。同时血Na~+,Cl~-和CO2-CP浓度与手术前相比下降(P<0.05),并且手术时间大于40分钟后吸收量、出血量的变化与血Na~+、Cl~-呈负相关性。结论:内腔镜监测仪能有效及时地监测出患者术中灌注液吸收量及出血量的准确数值,动态提供数据,使术者做出及时处理,降低了手术并发症;缩短手术时间可以减少术中灌流液的吸收量和出血量;手术时间超过40分钟后,会明显引起患者体内血电解质的变化,因此需要提前预防TURP综合征的发生。目的:上皮性卵巢癌和基底样乳腺癌在基因亚型,肿瘤微环境的免疫反应等方面有很多相似性,因此,这两种肿瘤可能存在药物治疗的交叉性。石蒜碱是一种天然的生物碱,经研究证实,石蒜碱对多种肿瘤都有抑制作用。本实验的目的是研究石蒜碱在体外对人卵巢癌SKOV3细胞及基底样乳腺癌MDA-MB-468细胞的作用,初步阐明自噬、凋亡、迁移侵袭机制在石蒜碱治疗卵巢癌和基底样乳腺癌过程中可能存在的共同机制。方法:经不同浓度的石蒜碱处理SKOV3和MDA-MB-468细胞72h后,在不同时间用MTT法检测细胞的增殖抑制率;应用流式细胞术检测两种细胞的细胞周期分布情况;Hoechst33258染色法观察细胞的凋亡形成;MDC法染色后在共聚焦显微镜下观察石蒜碱处理72h后SKOV3和MDA-MB-468细胞自噬小体的形成;结晶紫染色法观察不同浓度石蒜碱处理的细胞侵袭迁移细胞率的变化;Western immunoblotting法检测石蒜碱处理后对凋亡自噬相关蛋白(Bax、Bcl-2、PI3K、AKT、PAKT、P53、P62、LC3B、ATG5及caspase-3),迁移侵袭相关蛋白(MMP2,MMP9)的表达水平的影响。结果:在不同时间,不同浓度的石蒜碱抑制SKOV3和MDA-MB-468细胞的增殖是不同的,浓度越大,时间越长对细胞的抑制率越高;并将SKOV3细胞阻滞在细胞周期的G0/G1期和MDA-MB-468细胞周期阻滞在G2/M期;用25ug/ml的石蒜碱处理SKOV3和MDA-MB-468细胞24h、48h和72h后,SKOV3细胞凋亡率倍数分别为(1.32±0.108)、(1.61±0.098)和(1.77±0.087);MDA-MB-468细胞的凋亡率倍数分别为(1.43±0.13)、(1.74±0.14)和(2.15±0.14),两种细胞的凋亡率明显高于对照组细胞;MDC染色后,行激光共聚焦显微镜观察,结果显示石蒜碱干预后的SKOV3和MDA-MB-468细胞内有自噬小体形成;结晶紫染色观察石蒜碱能减弱SKOV3和MDA-MB-468细胞的侵袭迁移能力;两种细胞经石蒜碱处理后,自噬和凋亡相关蛋白表达检测结果显示,Bax和caspase-3的表达明显上调(P<0.05)而Bcl-2的表达水平显著下调(P<0.05);尽管总Akt和PI3K表达水平轻度上升,但PAKT表达水平下调,同时P53、LC3II和ATG5表达水平亦升高,而P62的表达水平下调(P<0.05),另外侵袭迁移相关蛋白MMP2和MMP9的表达亦下调(P<0.05)。结论:石蒜碱能同时对卵巢癌和基底样乳腺癌细胞的增殖活性进行抑制,并可以诱导细胞的凋亡和自噬效应,Bcl-2和PI3K/Akt信号通路可能参与了自噬凋亡的诱导过程。且石蒜碱能同时抑制这两种肿瘤细胞的迁移和侵袭。
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