奶牛酮病致病机理研究

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为了解荷斯坦奶牛分娩前后酮体等血液生化指标的动态变化特征以及各指标间的动态相关性,从而揭示奶牛酮病的高发时间以及与血酮、血糖等酮病指标相关性密切的肝功能指标变化特征,同时从分子生物学角度了解载脂蛋白APOB-100基因的目的片段结构及其与血酮之间的关系特点。本研究分两部分进行,研究一:对16头荷斯坦奶牛在分娩的-10(产前)、0(分娩当天)、2、3、7、14、21、28、35、42天,对血浆葡萄糖、酮体,总蛋白、白蛋白、球蛋白的含量以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)的活性进行了动态跟踪检测,了解各指标的含量、动态变化特点以及各指标之间的相关性,结果表明:1.奶牛肝功酶异常出现在血酮、血糖出现异常之前。几种被检酶的峰值出现在产后14天,蛋白含量的最高值出现在产后21天,而血酮峰值出现在产后28天,血糖最低值出现在产后35天。2.与非酮病牛相比较,酮病牛多项指标动态变化出现异常,机体对其有调节缓慢且不稳定的特点。3.OCT、GGT活性在亚临床酮病牛与非酮病奶牛之间存在着显著性差异。4.ALT、AST及血浆蛋白与血酮、血糖在统计学上相关性都不显著。研究二:对18头荷斯坦奶牛在分娩的0、7、14、21、28、35、42、49、56天分别测定其血浆葡萄糖、酮体、OCT、ApoB-100、甘油三酯、胆固醇浓度以及抽提全血DNA,参考人的ApoB-100可能的五个受体结合区之一,其相应于ApoB-100基因的3663—3782位密码子内,检测可能存在的突变,结果表明:1.血酮、血糖以及OCT的变化趋势与实验一相似,进一步证实了奶牛肝脏功能异常出现在血酮升高之前的论点;且病牛肝功酶异常值持时较长。除血糖外,酮病牛血酮和OCT值在产后21、28、35天在统计学上都存在着差异显著性。2.甘油三酯的变化呈波浪式起伏变化,周期为14天,于产后42天达最高值,酮病牛与非酮病牛在动态检测期间无显著差异。3.ApoB-100含量在分娩当天最高,产后持续高值出现在产后14—28天;总胆固醇含量自分娩后一直处于上升趋势,直至产后28天达峰值,而酮病牛的峰值则在产后35天出现。在产后21、28、35、42天,病牛总胆固醇水平都显著高于非酮病牛。4.酮病牛及非酮病牛在OCT与血酮、血糖之间都存在极显著相关性。5.ApoB-100与血酮、血糖在全体被检牛及非酮病牛的相关性都不显著,但在病牛却与血酮呈极显著相关(r=0.40.p<0.01),与血糖呈显著负相关(r=-0.34,p<0.05)。6.血浆总胆固醇与血酮、血糖在全体被检牛及非酮病牛都呈极显著相关,在病牛只与血酮呈极显著相关(r=0.40,p<0.01)。7.血浆甘油三酯与血酮、血糖都无显著直线相关性。8.在6mg/dL以下、6—10mg/dL,10mg/dL以上这三个血酮范围内,利用LIS-SSCP-PCR测定的apoB-100在3663—3782密码子内未有异常泳带出现,推测可能无基因突变。
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