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第一部分IFNy及CD40L诱导钙调神经磷酸酶依赖的VSMCs凋亡及其RANTES变化目的：观察γ干扰素(interferon-γ, IFNy)和CD40配体(CD40 ligand,CD40L)刺激下,大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)发生钙调神经磷酸酶(calcineurin, CaN)依赖的凋亡及其受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(Regulated on Activated Normal T-Cell Expressed and Secreted, RANTES)表达水平的关系。方法：采用组织贴块法体外原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,并随机分为6组。A组：DMEM培养基培养24h；B组和C组：分别在培养基中加入大鼠重组INFy (rINFy, 20ng/ml)和重组CD40L (rCD40L, 100ng/ml)培养24h；D组：在培养基中同时加入rIFNy及rCD40L(剂量同前)培养24h；E组：给予CaN抑制剂FK506(10ng/ml)预培养1h后再按D组条件培养24h；F组：给予RANTES的小干扰RNA(siRNA)转染6h后再按D组条件培养24h。收集细胞用Western Blot检测CaN表达水平；酶化学法检测CaN活性,提取细胞RNA采用RT-PCR检测RANTES的：mRNA表达；ELISA法检测上清中RANTES浓度,流式细胞仪检测细胞表面CD40表达及VSMCs凋亡。结果：通过CD40-CD40L信号通路,rINFy和rCD40L的联合刺激强烈地诱导了VSMCs内CaN的合成和活力以及RANTES的转录和表达。但在上述炎症因子刺激下,与VSMCs凋亡率呈持续正相关的是RANTES转录和表达水平(P<0.01),而不是CaN活力(P>0.05)。结论：炎症因子IFNy和CD40L可能通过调节RANTES的表达及分泌,调控了CaN依赖的VSMCs凋亡。第二部分兔动脉粥样硬化斑块内VSMCs凋亡与RANTES水平的相关性研究目的：研究血浆和斑块局部受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(Regulated on Activated Normal T Cell Expressed and Secreted, RANTES)表达水平与兔动脉粥样硬化斑块内血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)凋亡程度的相关性。方法：40只雄性家兔随机分为：(1)空白组(Blank组,10只)和(2)对照组(Control组,10只)：均普通饲料喂养16W；(3)稳定斑块组(AS组,10只)和(4)易损斑块组(VAP组,10只)：均高脂饮食(含胆固醇1%和猪油5%)喂养16W。Control和VAP组于16W处死前24和48h给予两次药物触发(蝰蛇毒±组织胺),Blank和AS组于16W处死前按上述时间、剂量、给药方法注射生理盐水。测定0W、16W各组血脂和血浆RANTES水平, Real Time-PCR和Western Blot检测主动脉RANTES转录和表达水平,TUNEL染色后计算各组斑块VSMCs凋亡率及其与RANTES水平的相关系数。结果：高脂喂养的家兔血脂较普通喂养组明显升高(P<0.01)。VAP组RANTES转录翻译水平和凋亡率明显高于AS组(P<0.01)、control组(P<0.0 1)和blank组(P<0.01);AS组明显高于control组(P<0.01)和blank组(P<0.01)；但AS组和control组间无显著性差异(P>0.05)。各组的VSMCs凋亡率与RANTES转录翻译水平均成正相关(P<0.05)。结论：RANTES过表达可能通过加重斑块局部的炎症反应而诱导了斑块内VSMCs凋亡第三部分兔动脉粥样硬化斑块易损性与RANTES水平的相关性研究目的：研究血浆和斑块局部受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(Regulated on Activated Normal T Cell Expressed and Secreted, RANTES)水平与家兔动脉粥样硬化斑块易损性的关系。方法：40只雄性家兔随机分为：(1)空白组(Blank组,10只)和(2)对照组(Control组,10只)：均普通饲料喂养16W；(3)稳定斑块组(AS组,10只)和(4)易损斑块组(VAP组,10只)：均高脂饮食(含胆固醇1%和猪油5%)喂养16W。Control和VAP组于16W处死前24和48h给予两次药物触发(蝰蛇毒±组织胺),Blank和AS组于16W处死前按上述时间、剂量、给药方法注射生理盐水。测定0W、16W各组血脂和血浆RANTES水平,检测16W各组斑块局部易损指数和校正的斑块面积、核因子-κB(nuclear factor-KB, NF-κB)和RANTES的转录和表达水平,计算易损指数和校正的斑块面积与RANTES转录和表达水平的相关性。结果：高脂喂养组的血脂较普通喂养组明显升高(P<0.01); Blank和Control组间的RANTES及斑块内NF-κB转录和表达水平无显著性差异(P>0.05)；从Blank/Control组到AS、VAP组,RANTES及斑块内NF-κB转录表达水平同步逐渐升高；VAP组易损指数和校正的斑块面积明显高于AS组(P<0.01)；血浆和局部的RANTES水平与易损指数和校正的斑块面积正相关(P<0.05)。结论：血浆和斑块局部的RANTES可能通过NF-κB信号通路诱导炎症反应导致了斑块不稳定。