基于亲水性分子印迹膜的丙烯酰胺仿生免疫分析方法研究

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:david_lau82
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
丙烯酰胺(AA)是一种合成聚丙烯酰胺和其他共聚物的有机单体,在食品中一般是富含淀粉类原料经过高温处理生成的有害物质,毒理学实验表明其具有神经毒性、致癌性和生殖发育毒性。2002年4月科研人员报道在油炸食品中检测到大量丙烯酰胺,因此,加强丙烯酰胺的检测和控制成为食品安全领域研究的热点,其形成机理、毒理特性、检测方法和预防措施等受到国际的广泛关注。本实验基于仿生酶联免疫新技术,建立了食品中丙烯酰胺快速检测新方法。主要研究结果如下:(1)设计合成丙烯酰胺半抗原、仿生抗体。分别以酰胺键、双键为连接位点,制备了0C、3C、8C等不同连接臂长度的4种丙烯酰胺半抗原。以辣根过氧化物酶(HRP)为标记酶,采用活泼酯法和戊二醛法分别制备不同位点的酶标记物。以水/乙腈溶液(2:3)为反应液、丙烯酰胺为模板分子、甲基丙烯酸(MAA)为功能单体、二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA)为交联剂、偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,利用本体聚合法直接在96孔酶标板表面上合成了亲水性的丙烯酰胺仿生抗体(分子印迹膜),通过扫描电镜可以看出,合成的分子印迹膜光滑平整。(2)优化丙烯酰胺检测实验处理条件。实验结果表明以酰胺键为连接位点、8C为连接臂长度的酶标记物对丙烯酰胺具有较好识别能力。在此基础上,分别对酶标记物稀释度、稀释液种类、稀释液pH进行优化实验,得出最佳条件为:酶标记物稀释度为1:3000,PBS为缓冲液,pH=7.02。(3)建立快速检测丙烯酰胺的仿生酶联免疫新方法。最佳条件下,该方法的灵敏度(IC50)和最低检出限(IC15)分别为8.0±0.4mg L-1、85.0±4.2μg L-1。对甘氨酰胺、丙烯酸、丙酰胺等结构类似物的交叉反应率CR <16%。本方法在100μg L-1、250μg L-1和500μgL-1三个浓度水平的添加回收率为90.0110.5%。对薯片和饼干进行实际样品检测,浓度分别为0.440±0.016mg kg-1和0.424±0.028mg kg-1,与气相色谱法(薯片:0.465±0.029mg kg-1,饼干:0.438±0.031mg kg-1)对比,数据一致,无显著性差异(P>0.05)。
其他文献
文章对云计算的概念及优势进行了简要概述,分析了我国医疗信息化建设中存在的问题与不足,并就云计算在医院信息化建设中的应用、存在问题及解决方法进行了探讨。
MIL-STD-1553B总线标准是由美国军方提出的一种航空总线标准,在军事、工业领域得到了广泛的应用。目前满足1553B总线标准的协议处理板卡及处理芯片大多被国外单位垄断,因此研究
<正>初中数学当中,圆是最优美的图形.它内涵丰富、性质多样.圆的性质定理有:圆的基本性质、垂径定理、圆周角性质定理、圆的对称性、圆的切线的性质等.它们对应了圆中的条基
<正>《养生主》是庄子的名篇,历代多有阐释者。其中庖丁解牛一段又被选入中学课本,使人们更多地知晓了其养生观念。然而,因为解读的角度不同,人们对庄子的养生思想多有微词。
存货,是指企业在日常活动中持有以备出售的产成品或商品、处在生产过程中的在生产过程或提供劳务过程中耗用的材料和物料等。存货计价的正确与否,不仅影响到资产的真实性,而
教育家写申斯基曾说过:“没有丝毫兴趣的强制性学习,将会扼杀学生探求真理的欲望。”确实,需要和兴趣在很大程度上影响着主体意识的发展水平,这与我们理念也是相互通融的。艺术教
近几年银行同业业务发展十分迅速,并且逐渐呈现出对公业务、对私业务和同业业务三足鼎立的局面。而商业银行同业业务在发展过程当中,也不可避免的对我国货币政策造成了一定影
目的:对慢性闭塞性病变患者行介入治疗过程中可能出现的并发症做风险预测,及早采取预防措施,给予相应护理,减少并发症的发生,避免造成严重后果。方法:回顾性分析我导管室432例
<正>如果真要细究起来,说意大利菜是法国菜的鼻祖也不为过。巴黎,是世人公认的浪漫之都。无论是塞纳河边的散步,还是香榭丽舍林荫下的低徊,包括酒吧里的慢酌与咖啡馆里的细语
甘肃省中药南沙参资源调查周印锁,丁义兰,徐涛(兰州医学院药学系生药学教研室730000)StudiesonCultringtheEmbryoofTripterygiumhypoglaucum(Level.)Hutch.inVitro¥GuoXiaoh...