荷叶黄酮新型双水相萃取耦合技术及其微囊化与应用研究

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我国荷叶资源丰富,除个别省份外,全国各地均有分布。由于黄酮类化合物容易被氧化,且在水中的溶解度很小,使得荷叶利用率不高,造成了大量的资源浪费。本论文采用新型双水相萃取耦合技术分离纯化荷叶黄酮,并对制备的荷叶黄酮进行微胶囊化,以期扩大荷叶黄酮的应用范围。首先采用新型双水相萃取耦合技术分离纯化黄酮类化合物,单因素试验考察了乙醇浓度、磷酸盐浓度、pH值、相体积比和萃取次数等对黄酮萃取率的影响,同时以DPPH自由基清除率和皮肤刺激性试验,初步评价荷叶黄酮提取物的抗氧化性和安全性。得到双水相萃取荷叶黄酮的最佳工艺为:43%乙醇(V/V),0.35 g/mL磷酸氢二钾,原体系pH,黄酮收率3.6%,纯度为80.5%。DPPH自由基清除率和皮肤刺激性试验表明荷叶黄酮的抗氧化能力较强,且对大鼠皮肤安全无刺激性。然后采用薄膜分散法制备荷叶黄酮脂质体,以包封率为主要指标,通过正交设计试验优化荷叶黄酮脂质体的制备工艺,同时建立大孔树脂富集结合UV法对黄酮含量和脂质体包封率进行测定。结果脂质体最佳制备工艺为:无水乙醇为有机相,磷酸缓冲液(pH为6.8)为水相,且有机相与水相的体积比为2:1,药脂比1:5,大豆卵磷脂与胆固醇之比6:1,包埋温度50 ~oC。制备的荷叶黄酮脂质体呈淡黄色,平均粒径为553.49 nm,最大包封率为36.56%,同时,稳定性试验和DPPH自由基清除率试验结果表明,脂质体包埋技术能够显著提高荷叶黄酮的稳定性,且不改变其生物活性。研究表明采用新型耦合双水相萃取选择性分离纯化黄酮类化合物的工艺,克服了黄酮类成分在提取过程中易氧化变质的问题,同时较现有工艺具有工艺简单、低能耗、成本低、无污染、产品收率和纯度高等优点。优化工艺的薄膜分散法适于制备性质稳定的黄酮脂质体,同时建立的大孔树脂富集结合UV测定黄酮脂质体的包封率,可以作为考察荷叶黄酮脂质体制备工艺的指标检测方法。
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