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彩绘文物是人类文明进步的遗产,具有非常重要的历史、考古、艺术和科学价值。保护和修复彩绘文物对中国、世界,乃至全人类有着十分重要的意义。彩绘颜料胶结材料的老化、降解等化学反应是彩绘文物受损的主要原因。本文采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)法对古代文物彩绘颜料胶结材料进行了蛋白质组学研究。研究了彩绘文物胶结材料中蛋白质的提取工艺,对比了5种试剂(NaOH、TFA、HCOOH, HCl及NH3·H2O)提取蛋白质的优劣,采用响应曲面法(RSM)优化古代彩绘文物胶结材料中蛋白质的超声辅助提取条件；进行了胶结材料鸡卵白蛋白的蛋白质组学研究；采用MALDI-TOF-MS法分析和表征了鸡卵白、鸡卵黄和动物胶及其彩绘颜料模拟样品,建立了鸡卵白、鸡卵黄和动物胶胶结材料的肽质量指纹图谱。结果表明：TFA被证明具有很大的应用前景,可用于胶结材料中蛋白质提取及MALDI-TOF-MS分析表征研究；TFA超声辅助提取鸡卵蛋白中蛋白质的最佳条件为TFA的浓度为0.53%,超声功率为50%,超声时间为40 min；TFA超声辅助提取动物胶中蛋白质的最佳条件为TFA的浓度为0.81%,超声功率为70%,超声时间为38.5 min；6种胶原蛋白在放养鸡卵白蛋白中被首次发现,8种胶原蛋白在笼养鸡卵白蛋白中被首次发现；EDTA可以有效络合颜料中的金属离子,释放出蛋白质：与朱砂相比,石绿中的铜离子和蛋白质中的氨基酸产生强络合作用,对蛋白质的表征影响较大。本论文包括五部分：第一章绪论概述了彩绘文物胶结材料研究方法,介绍了质谱法的原理及其在胶结材料分析中的应用、蛋白质组学研究方法和策略,在此基础上提出了本课题的选题依据和研究内容。第二章鸡卵白胶结材料中蛋白质的提取工艺研究研究了古代彩绘文物胶结材料中蛋白质的超声辅助提取条件,从五种不同的蛋白质提取剂TFA、HCOOH、HCl及NH3·H2O)中筛选出一种良好的提取剂,采用响应曲面法(RSM)优化了古代彩绘文物胶结材料中蛋白质的超声辅助提取条件。第三章鸡卵白蛋白的蛋白质组学研究采用MALDI-TOF-MS法表征了放养鸡和笼养鸡卵白中的蛋白质。研究了胶结材料鸡卵白中蛋白质的酶解,主要考察了酶和底物的比例、酶解时间、酶解pH等三个因素对蛋白质酶解的影响。第四章鸡卵及其模拟样品的MALDI-TOF-MS分析与表征研究了鸡卵白和鸡卵黄模拟样品中蛋白质的测定条件,干扰的消除方法,建立了鸡卵白、鸡卵黄及其模拟样品的肽质量指纹图谱。第五章动物胶模拟样品中蛋白质的提取及MALDI-TOF-MS分析与表征采用响应曲面法(RSM)优化了动物胶胶结材料中蛋白质的TFA超声辅助提取条件,采用MALDI-TOF-MS法表征了动物胶及其模拟样品中蛋白质,建立了动物胶及其模拟样品的肽质量指纹图谱。